高效液相色谱及高效毛细管电泳用于中药制剂中氨基酸成分的分析

摘要

提高分离能力和改进分离的选择性一直是分离科学中具有挑战性的研究工作,而高效液相色谱和高效毛细管电泳则是分离科学中最重要的两个工具。高效液相色谱由于具有较高的分离能力和很好的重现性,己成为生命科学、药物科学等领域不可缺少的分析手段。近十年来,高效毛细管电泳以其分离效率高、分析速度快、所需样品少以及消耗低等优势,展示了其在分析领域中巨大的应用潜力,己成为高效液相色谱的有力补充。
　　本论文即选择高效毛细管电泳和高效液相色谱这两种旨在提高分离能力的工具,建立了两种高效、快速、稳定、可靠的氨基酸分离方法,对中药试剂中的氨基酸成分进行了含量测定,并全面考察和验证了方法的稳定性和准确度。
　　本论文由以下3章内容组成:
　　第一章对高效液相色谱技术和高效毛细管电泳技术的理论、分离模式及在药物分析中的应用进行了综述;对氨基酸的分析方法及主要的柱前衍生试剂进行了综述。
　　第二章采用邻苯二甲醛(OPA)为衍生试剂,构建了一个氨基酸柱前衍生的高效液相色谱分析系统。在30min内,将中药试剂中的13种氨基酸达到基线分离;优化了衍生反应条件和色谱分离条件,包括OPA衍生试剂与氨基酸的衍生比例、梯度洗脱程序、紫外检测波长等。分离效果较好,具有良好的线性关系和很高的精密度,各氨基酸衍生物的峰面积RSD值除赖氨酸(11.6％)外,其余均在0.4％～6.1％之间。OPA衍生氨基酸反应速度快,HPLC快速、高效的特点,使得该方法具有普遍的适用性。
　　第三章以异硫氰酸荧光素(FITC)为衍生试剂,建立了一种高效毛细管电泳-激光诱导荧光检测技术用于测定中药制剂中氨基酸成分的方法,在50 min内将15种氨基酸完全分离。分离效果较好,具有良好的线性关系,很高的精密度和回收率。考察了衍生比例、背景电解质、电压等因素对分离分析的影响。毛细管柱不易污染、易清洗的特点,使得该方法尤其适用于对中药制剂的分析,同时结合激光诱导荧光检测器,有效的消除了许多基质带来的干扰,且灵敏度高。

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第一章绪论

1.1高效液相色谱技术及其在中药分析中的应用

1.2高效毛细管电泳技术及其在中药分析中的应用

1.3 氨基酸的分析

1.4本论文的主要工作

第二章高效液相色谱技术在中药制剂中氨基酸成分分析中的应用

2.1前言

2.2 实验部分

2.3结果与讨论

2.4本章小结

第三章高效毛细管电泳技术在中药制剂中氨基酸成分分析的应用

3.1前言

3.2实验部分

3.3结果和讨论

3.4本章小结

全文总结

参考文献

附录: 硕士期间完成的论文情况

致谢