经颅磁刺激对脑梗死大鼠学习记忆和海马区神经细胞的影响

摘要

背景和目的：脑梗死长期以来作为影响人类健康的危险因素，及时的手术和药物治疗虽然可以挽救患者的生命，但仍有至少50％的患者存在一定程度的功能障碍是临床治疗不能解决的问题，许多学者针对功能障碍等后遗症问题进行了多年的研究，渴望寻求解决方案。经颅磁刺激（transcranial magnetic stimulation,TMS）以其无创、有效、操作便捷等特点在近年来受到普遍的关注，它通过一定频率的磁场直接作用于大脑，对皮质产生抑制或者兴奋的效应，并利用神经元产生的电活动，对神经系统疾病发挥了治疗作用。虽然其发挥作用的具体机制尚未被完全明确，但其国内外学者通过大量的动物实验和临床数据证实TMS具有激活神经干细胞增，加强轴突、树突之间的突触联系，改善梗死区血供、减轻水肿等方面的作用，本研究通过对脑梗死大鼠给予一定强度的经颅磁刺激治疗，并利用行为学及免疫组化的手段，就经颅磁刺激对脑梗死大鼠学习记忆能力影响进行观察和研究，并对海马区神经细胞的增殖规律加以分析，研究经颅磁刺激对脑梗死大鼠学习记忆及海马区神经细胞的影响，以期为进一步探讨TMS治疗脑梗死提供理论依据。方法：成年雄性SD大鼠150只，利用随机法分为40%磁刺激组、60%磁刺激组和80%磁刺激组、假刺激组和空白对照组5个组别，每组大鼠30只，各组分别于大脑中动脉梗塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型成功建立后按照设定参数分别接受TMS治疗，假刺激组除不给予磁刺激外，在实验中其它干预条件皆通TMS组，空白对照组则不予任何干预。并于1d、3d、7d、14d、21d、28d分别对各组大鼠进行行为学和免疫组化观察及记录相应指标数据。通过大鼠条件性饮水试验评估不同强度的磁刺激对脑梗死大鼠学习记忆能力的影响；通过神经元（anti-NeuN）免疫染色，分析不同强度的磁刺激对脑梗死大鼠海马区神经元增殖、分化的影响，最后利用统计分析及光镜图像分析软件对产生的数据和图像进行分析。结果：1.在饮水试验中：所有组别大鼠的习得率与训练时间呈正相关，潜伏期与训练时间呈负相关；空白对照组大鼠在5个组别中习得率最高，潜伏期最短；磁刺激组相对假刺激组，其习得率的增幅和潜伏期的降幅更大(p<0.05)；磁刺激组内比较，60%磁刺激组的习得率最高、增幅最大，潜伏期最短，降幅最大(p<0.05)。2.荧光显微镜下可见：空白对照组大鼠镜下NeuN免疫阳性物计数随时间无明显增减变化（p>0.05）,其余4组大鼠NeuN免疫阳性物与时间呈正相关变化；空白对照组大鼠各时间段镜下可见NeuN免疫阳性物计数明显多于磁刺激组和假刺激组(p<0.05)；磁刺激组与假刺激组对比，磁刺激各组在镜下可见NeuN免疫阳性物计数随时间递增的速度均高于假刺激组(p<0.05)；磁刺激组内比较，60%磁刺激组镜下可见NeuN免疫阳性物计数相对最多，增幅最大，80%磁刺激组和40%磁刺激组的免疫阳性物计数相对较少，增幅较小(p<0.05)。结论：1.经颅磁刺激对大鼠大脑中动脉梗塞后学习记忆能力起到一定的改善作用；2.经颅磁刺激对脑梗死大鼠海马区成熟神经元的增加有积极的促进作用；3.中等强度的磁刺激对脑梗死大鼠学习记忆改善程度最好、海马区成熟神经元增加最多。

目录

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分：经颅磁刺激对脑梗死大鼠学习记忆能力的影响

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验方法

3 条件性饮水反射行为训练

4 实验动物的干预

5 统计学分析

结果

1动物模型复制情况

2 条件化饮水反射训练中的参数变化

讨论

参考文献

第二部分：经颅磁刺激对脑梗死大鼠海马区神经细胞的影响

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验方法

3 免疫组化

4 统计学分析

结果

1 动物模型复制情况

2 NeuN免疫阳性物观察

讨论

结论

参考文献

英汉缩略名词对照

附图：

研究生期间发表文章：

致谢

综述:经颅磁刺激近年在神经康复医学中的应用

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