基于纳米酶催化的有机磷农药生物条形码分析方法研究

目录

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主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 农药的研究进展

1.1.1 农药的危害

1.1.2农药残留的检测技术

1.2纳米酶的研究进展

1.2.1纳米酶催化类型

1.2.2纳米酶在食品中的应用

1.3生物条形码的研究进展

1.4本课题的研究目的和研究内容

1.4.1 本课题的研究目的和意义

1.4.2 本课题的研究内容与路线

第二章 基于Pt催化的对硫磷残留生物条形码免疫分析方法研究

2.1 前言

2.2 材料与方法

2.2.1主要试剂

2.2.2主要仪器

2.2.3 免疫反应中缓冲体系

2.2.4设计纳米酶探针生物条形码序列

2.2.5 对硫磷半抗原与OVA偶联(PA-OVA)

2.2.6 制备胶体金纳米探针

2.2.7 制备纳米酶Pt探针

2.2.8 制备磁性纳米颗粒（MNPs）探针

2.2.9 优化竞争反应体系的工作浓度

2.2.10 建立基于纳米酶Pt催化的生物条形码免疫分析方法

2.2.11 样品的前处理

2.2.12 G C-M S 条件

2.3 结果与讨论

2.3.1 胶体金探针的制备

2.3.2 制备纳米酶Pt探针

2.3.3优化免疫反应体系工作浓度

2.3.4 基于纳米酶催化的生物条形码免疫分析方法建立及应用

2.3.5 与仪器分析方法的确证

2.4 结论

第三章 基于Au@Pt催化的对硫磷残留生物条形码免疫分析方法研究

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.2.1 主要试剂

3.2.2 主要仪器

3.2.3 免疫反应中缓冲体系

3.2.4 设计生物条形码序列

3.2.5对硫磷半抗原与OVA偶联(PA-OVA)

3.2.6 Au@Pt颗粒的制备

3.2.7 生物条形码和互补链以及生物素标记DNA链的活化

3.2.8 胶体金探针的制备

3.2.9 Au@Pt探针的制备

3.2.10 HRP探针的制备

3.2.11 MNPs探针的制备

3.2.12 pH值的优化

3.2.13 BSA浓度的优化

3.2.14 反应时间的优化

3.2.15 优化竞争反应体系的工作浓度

3.2.16 基于酶催化的生物条形码免疫分析方法的建立

3.2.17 样品的前处理

3.2.18 LC-MS/MS条件

3.3 结果与讨论

3.3.1 Au@Pt颗粒合成优化

3.3.2 Au和Au@Pt颗粒的表征

3.3.3 Au探针和Au@Pt探针的表征

3.3.4 Au-HRP探针的表征

3.3.5 Au探针、Au@Pt探针和Au-HRP探针紫外可见图谱表征

3.3.6 基于纳米酶Au@Pt催化的生物条形码免疫反应条件的优化

3.3.7 基于天然酶HRP催化的生物条形码免疫分析

3.3.8 基于纳米酶Au@Pt和天然酶HRP催化的生物条形码免疫分析

3.3.9 方法的确证

3.4 结论

第四章 基于Au@Pt催化的农药多残留生物条形码免疫分析方法研究

4.1前言

4.2 材料与方法

4.2.1 主要试剂

4.2.2 主要仪器

4.2.3 免疫反应中缓冲体系

4.2.4 设计生物条形码序列

4.2.5 Au@Pt颗粒的制备

4.2.6 生物条形码的活化

4.2.7 三种农药胶体金探针的制备

4.2.8 三种纳米酶Au@Pt探针的制备

4.2.9三种农药半抗原磁性纳米颗粒（MNPs）探针的制备

4.2.10 羧基修饰DNA链标记96孔板

4.2.11 基于纳米酶Au@Pt催化的生物条形码免疫分析的建立

4.2.12 样品的前处理

4.2.13 L C-M S/M S 条件

4.3 结果与讨论

4.3.1 胶体金探针的制备与表征

4.3.2 多种残留生物条形码免疫分析中工作浓度的优化

4.3.3 三种农药标准曲线的建立

4.3.4 样品的基质标准曲线的建立

4.3.5 样品的添加回收

4.3.6 确证分析

4.4 结论

第五章 结论

5.1 全文总结

5.2 创新点

5.3 展望

参考文献

致 谢

作者简历