安徽地区献血者Miltenberger血型多态性分布及GP.Mur血液临床输注的回顾性分析

摘要

背景：Miltenberger血型系统是MNS血型系统的亚系统,GP.Mur是该系统的一种表型,其在欧美人群中罕见,临床意义小,但在一些东方人群中分布频率较高,有研究表明其抗体抗-Mur可以引起溶血性输血反应(HTR)及新生儿溶血病(HDN)。目前,我国临床输血前尚未常规筛查Mur抗原,因此研究Miltenberger血型系统的多态性分布及GP.Mur的临床作用对于提高我国的临床输血安全有着重要的意义。　　目的：(1)建立一种简单、快速检测Miltenberger血型系统的方法,并调查安徽地区献血者Miltenberger血型系统的多态性分布情况。　　(2)对接受GP.Mur阳性血液的患者进行回顾性调查,研究GP.Mur阳性血液的临床意义。　　方法：(1)根据Miltenberger血型系统的分子基础,设计特异性引物,采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)初筛和测序确认,建立Miltenberger血型系统的PCR-SSP-测序的分子生物学检测方法。并采用抗-Mur标准血清进行验证其方法的准确性。　　(2)采用经验证的PCR-SSP-测序的方法在安徽汉族无偿志愿献血人群中进行Miltenberger血型系统的多态性分布调查。　　(3)对安徽省血液中心2011-2013年献血者中GP.Mur阳性血液进行临床输注的回顾性调查,对受血者开展Miltenberger血型鉴定和抗-Mur抗体检测并进行临床输注效果分析。　　结果：(1)本研究成功建立了Miltenberger血型系统的PCR-SSP-测序的分子生物学检测方法。经血清学方法验证完全符合。　　(2)从2660例安徽汉族志愿献血人员中经PCR-SSP筛查24例Miltenberger血型阳性个体,占0.9％。Miltenberger血型阳性个体测序结果均与GenBank的JN201202序列(即GP.Mur序列)一致,说明Miltenberger血型阳性个体均为GP.Mur表型。　　(3)研究发现24例GP.Mur阳性献血者,共捐献50个单位悬浮红细胞(RBC)和11个单位血小板,这些血液用于35例患者,追踪调查到输注GP.Mur阳性血液的患者12例,其中男性8例,女性4例。经检测这些患者Miltenberger血型均为GP.Mur阴性。经临床调查发现,其中2例输注GP.Mur阳性血小板,10例输注GP.Mur阳性红细胞,经抗体筛选和鉴定,其中输注GP.Mur阳性红细胞的2例无输血史和免疫史的患者血清含有抗-Mur抗体,效价分别为2和4。　　结论：(1)安徽省汉族无偿献血人群Miltenberger血型系统检测,只发现GP.Mur表型,其频率为0.9%。　　(2)输注GP.Mur阳性红细胞的患者产生了抗-Mur抗体,可以引起输血反应,建议输血前常规筛查GP.Mur血型。

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1 引言

1.1 MNS血型系统简介

1.2 Miltenberger血型系统简介

1.3 GP.Mur表型的频率及其抗体的临床意义

1.4 GP.Mur的分子机制及功能

1.5 GP.Mur表型及抗-Mur抗体的检测

第一部分 Miltenberger血型系统PCR-SSP-测序的分子生物学检测方法的建立

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果

3.1 验证试验

3.2 平行试验

4 讨论

第二部分 安徽地区献血者Miltenberger血型多态性分布

2 材料与方法

2.1 实验材料、仪器、试剂及方法同第一部分

2.2 研究对象

3 结果

3.1 PCR-SSP检测Miltenberger血型系统

3.2 基因测序结果分析

4 讨论

第三部分 GP.Mur血液临床输注的回顾性分析

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果

3.1 临床标本来源

3.2 受血者GP.Mur血型检测

3.3 血型血清学鉴定

3.4 受血者血清抗体鉴定（微柱凝胶试验，MGT）

3.5 抗体效价测定

3.6 病例分析

4 讨论

5 结论

参考文献

附图：红细胞血型抗体鉴定细胞反应格局表

附录

致谢

综述