小鼠囊胚活检用于植入前遗传学诊断及玻璃化冷冻囊胚的初步实验研究

摘要

目的：通过动物实验：(1)探讨补肾中药养精种玉汤对增强昆明小鼠超数排卵效果、提高获卵率的应用价值以及对改善小鼠体外受精胚胎发育潜能的影响；(2)探讨囊胚腔穿刺获取滋养细胞的可行性；探讨穿刺抽吸囊胚腔液对囊胚的发育潜能以及着床能力的影响；尝试对囊胚滋养细胞作单细胞染色体分析及全基因组扩增，为植入前遗传学诊断建立技术基础；(3)观察穿刺后囊胚玻璃化冷冻保存的效果；探讨使用冷冻平皿为载体，冷冻液中添加血清替代物的方法提高玻璃化冷冻效果的价值；从而为临床辅助生育治疗中改善卵巢的超数排卵效果和改善胚胎质量探索新方法；为胚胎植入前遗传学诊断建立新的囊胚活检方法；改进囊胚玻璃化冷冻的相关技术。 结论：1.中药养精种玉汤可以改善昆明小鼠的超排卵效果，获卵率增加，体外受精时卵裂率、桑葚胚、囊胚的形成率提高，说明对改善胚胎的发育潜能有作用；2.穿刺对小鼠囊胚发育的影响小，囊胚能再次顺利扩张，可重复穿刺，并不影响囊胚的孵化；3.获得的滋养细胞可以满足作染色体核型分析以及基因检测等遗传学分析；4.穿刺后可以有效降低冷冻对囊胚的损伤；使用冷冻平皿并在冷冻液中添加SSS可以提高玻璃化冷冻的效果。

目录

学位论文独创性声明和使用授权声明

引言

第一部分 养精种玉汤对混明小鼠超数排卵及胚胎发育潜能影响的初步实验观察

1实验材料

2实验内容与方法

3统计分析

4结果

5讨论

6结论

参考文献

第二部分 小鼠囊胚活检与滋养细胞的遗传学分析

1材料与方法

2实验内容与方法

3结果

4讨论

5结论

参考文献

第三部分 小鼠囊胚的玻璃化冷冻保存

1实验材料

2方法

3统计分析

4结果

4讨论

5结论

参考文献

附图

附录

致谢

综述一 植入前遗传学诊断的研究进展

综述二 胚胎的玻璃化冷冻