普洱茶提取液对喹烯酮亚慢性暴露所致SD大鼠肾脏DNA损伤的保护作用

摘要

目的:评价喹恶琳类新型抗菌促生长兽药喹烯酮在亚慢性暴露下对SD大鼠肾脏的氧化性DNA损伤，并通过添加具抗氧化作用的普洱茶提取液的干预，来探讨普洱茶提取液对喹烯酮所致DNA损伤的保护作用。
　　方法:
　　1.以SD大鼠造模设置组别依次为喹烯酮组(QCT,2400mg/kg/day)、普洱茶补充高剂量组(QCT+PBTE-H,1000mg/kg/day)、普洱茶补充低剂量组(QCT+PBTE-L,500mg/kg/day)、正常对照组(Control,0mg/kg/day)及普洱茶对照组(PBTE control, 1000mg/kg/day) 。喹烯酮通过混入正常饲料给予SD大鼠，普洱茶提取液通过灌胃给予SD大鼠。饲养13周后处死。
　　2.采集SD大鼠血液标本，测定血清中尿素氮(BUN)和肌酐（Crea)水平。取肾组织制作病理切片，经H&E (Hematoxylin and Eosin)染色后观察肾脏病理变化情况。
　　3.制作肾组织冰冻切片，经超氧化物阴离子荧光探针(Dihydroethidium, DHE)染色后检测肾组织ROS水平。
　　4.制备肾脏组织匀浆，测定丙二醛(MDA)、谷肌甘肤(GSH)、谷肌甘肤-S转移酶(GST),谷肌甘肤还原酶(GR)、谷肌甘肤过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)等氧化抗氧化指标。
　　5.制备肾分离细胞悬液，通过彗星试验评价肾细胞DNA损伤水平。
　　6.收集大鼠尿液，高效液相电化学法测定尿8-OHdG水平。
　　结果:
　　1.喹烯酮组中,肾脏呈现出病理改变;Cr和BUN在SD大鼠血清中浓度显著提升,比对照组高13.5％和13.3%(P<0.05);肾脏ROS水平升高,MFD值显著高出对照组(P<0.01);脂质过氧化水平升高了32.9%(P<0.01),抗氧化物质GSH含量降低了25.2%(P<0.01),抗氧化酶GPx、GST、GR等活性均受到抑制,分别降低了22.3%(P<0.01)、35.6%(P<0.05)、33.3%(P<0.05);彗星试验中OTM值较对照组升高10.7%(P<0.01);大鼠尿液8-OHdG水平也明显高于对照组(P<0.05)。
　　2.普洱茶提取液干预组中,肾脏病理改变程度较喹烯酮组减轻;Cr和BUN在SD大鼠血清中浓度对比喹烯酮组有所降低;肾脏ROS堆积情况缓解,MFD值低于喹烯酮组(P<0.05);脂质过氧化水平降低30.2%(P<0.01),抗氧化物质GSH含量升高9.1%,抗氧化酶GPx、GST等活性分别升高29.8%(P<0.01)、20.8%(P<0.05);彗星试验中OTM值较喹烯酮组低68.4%(P<0.01);大鼠尿液8-OHdG水平较喹烯酮组也明显降低(P<0.05)。
　　结论:亚慢性暴露下的喹烯酮可以引起机体的氧负荷,造成DNA氧化损伤,普洱茶提取液则对喹烯酮所致的DNA氧化损伤呈现出一定的保护作用。

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中文摘要

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前 言

1 材料和方法

1.1试剂和仪器

1.2 受试物

1.3 试验动物

2实验方法

2.1动物分组及饲养

2.2 组织病理检查

2.4 ROS检测

2.5 肾脏匀浆氧化抗氧化指标检测

2.7 SD大鼠尿液8-OHdG检测

2.8 统计分析

3 研究结果

3.1 一般毒理学指标观察

3.2 ROS检测

3.3 肾脏匀浆线粒体生化检测

3.4 肾分离细胞DNA损伤检测

3.5 SD大鼠尿液8-OHdG检测

4 讨 论

后续研究

参考文献

综 述

参考文献

附录一

附录二

致谢