慢性HBV患者感染肠道双歧杆菌种群结构改变的研究

摘要

目的：对慢性HBV感染患者肠道双歧杆菌种群结构表型和多样性进行研究。
　　 方法：收集16例慢性乙型肝炎患者、16例乙肝肝硬化患者以及15例健康对照者粪便标本，提取粪便总DNA后首先应用基于巢式PCR扩增的变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析三组间双歧杆菌种群多样性并对主条带进行克隆鉴定；再利用属特异性克隆文库分析序列进化关系并确定各组种群构成比例；最后，基于以上定性分析结果，利用荧光定量PCR对主要菌种进行定量分析。
　　 结果：虽然三组间双歧杆菌种群多样性未出现明显改变(P=0.196)，但是PCR-DGGE图谱、克隆文库和荧光定量PCR结果均显示在疾病组尤其是肝硬化组中Bifidobacterium dentium的检出率显著增加。与B.dentium相反，Bifidobacterium catenulatum/Bifidobacterium pseudocatenulatum在肝硬化组的检出率明显低于健康对照组，荧光定量PCR结果表明该菌种的数量也显著减少(P=0.023)。虽然三组间Bifidobacterium longum的数量未出现显著性差异，但是荧光定量PCR结果显示肝硬化组中B.longum的检出率明显低于慢乙肝组和健康对照组(P=0.011)。
　　 结论：慢性HBV感染患者肠道双歧杆菌种群结构发生了明显的改变，主要表现为B.catenulatum/pseudocatenulatum和B.longum的减少，B.dentium的增加。