miRNA21、miRNA29b、miRNA133a在心肌纤维化大鼠心肌组织及循环中的表达

摘要

本研究目的是为了比较厄贝沙坦及辛伐他汀对大鼠心肌纤维化的影响作用，探索miRNA21，miRNA29b，miRNA133a在心肌纤维化中的表达调控及血清中的含量是否与组织表达程一致性。实验选用体重200~220gSD雄性大鼠50只，行腹主动脉缩窄术后二周随机分为5组，灌胃给药，予假手术组及模型组0.5％羧甲基纤维素钠（0.5ml/d）、厄贝沙坦组（厄贝沙坦20mg.Kg/d）、辛伐他汀组（辛伐他汀5mg.Kg/d）及联合用药组（厄贝沙坦20mg.Kg/d+辛伐他汀5mg.Kg/d），连续8周后测定体重、血压、心脏指数、血清AngII，超声测左室舒张末期（LVD）、左室收缩末期（LVS）、室间隔（IVS）直径，HE染色观察心肌细胞，Masson染色观察胶原、测心肌胶原容积（CVF），免疫组化观察并半定量测转化生子因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）及血管紧张素受体1（ATR1），Western blot定量测TGF-β1、CTGF及ATR1蛋白含量，qPCR法检测各组心肌组织及血清中miRNA21，miRNA29b， miRNA133a的表达含量。
　　本研究表明，与假手术组比，模型组的心脏指数、室间隔、CVF、TGF-β1、CTGF均增高，体重、ATR1降低；与模型组相比，厄贝沙坦组、辛伐他汀组体重增加，联合用药组体重降低，厄贝沙坦组、辛伐他汀组心脏指数、室间隔、EF、CVF、TGF-β1、CTGF、ATR1降低（P＜0.05），而联合用药组除ATR1增高（P＜0.05）外，其余均低于单一用药组（P＜0.05）。组织中miRNA21：与假手术组相比，厄贝沙坦组降低，模型组轻微降低，辛伐他汀组、联合用药组增高；miRNA29b：与假手术组相比，辛伐他汀组增高，厄贝沙坦组、联合用药组、模型组降低；miRNA133a：与假手术组相比，厄贝沙坦组、辛伐他汀组、联合用药组、模型组均降低；血清中除miRNA29在辛伐他汀组水平略高于假手术组外，其余组表达水平均低于假手术组。因此认为厄贝沙坦及辛伐他汀均能缓解心肌纤维化，联合用药效果好于单一用药，尽管出现了不明原因的ATR1含量增加。需根据适应症使用以减少药物不良反应。miRNA21，miRNA29b，miRNA133a在组织中的表达与纤维化程度有一定关系，在血清中的表达均高于正常对照组，有一定意义。

目录

声明

中英文缩略词对照表

第一章 绪 论

1.1 心肌纤维化及相关miRNAs的背景介绍

1.2 本文主要工作

1.3 本论文的结构安排

第二章 实验方法及结果

2.1.1药品与试剂

2.1.2 仪器

2.1.3 耗材

2.1.4 实验动物

2.2 方法

2.2.1模型制备、分组、给药处理及标本采集

2.2.2 数据测量

2.3.1一般情况、体重、心脏指数、血压、心脏彩超及血清AngII

2.3.2 病理结果

2.3.3 免疫组化

2.3.4 Western blot

2.3.5 q-PCR

第三章 讨 论

第四章 结 论

4.1 本文的主要结论

4.2 本实验的不足

4.3 下一步工作的展望

致谢

参考文献