声明
摘要
缩略语
第一章 研究背景
1.1 微生物体内的硫氧化简介
1.2 嗜酸性喜温硫杆菌简介
1.2.1 嗜酸性喜温硫杆菌的生理特性
1.2.3 嗜酸性喜温硫杆菌tetH基因簇的简介
1.3 双组分调控系统
1.3.1 双组分调控系统的基本组成和作用机制
1.3.2 双组分调控系统的分类
1.3.3 组氨酸激酶(HK)的结构
1.3.4 响应调控蛋白(RR)的结构
1.3.5 嗜酸性喜温硫杆菌中的双组分调控系统
1.4 嗜酸性喜温硫杆菌遗传操作系统
1.4.1 嗜酸性喜温硫杆菌的接合转移系统
1.4.2 嗜酸性喜温硫杆菌的基因无痕敲除技术
1.5 本文的研究目的、内容及意义
1.5.1 研究目的
1.5.2 研究内容
1.5.3 研究意义
第二章 A.caldus MTH-04硫能源培养过程的基因表达谱分析
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 菌株和质粒
2.2.2 培养基和培养条件
2.2.3 试剂和仪器
2.2.4 实验方法
2.3 研究结果
2.3.1 A.caldus培养的优化及pH检测
2.3.2 A.caldus以硫粉为能源培养过程中的基因表达谱分析
2.4 结果讨论
第三章 嗜酸性喜温硫杆菌中tetH基因簇的分析研究
3.1 引言
3.2 材料和方法
3.2.1 菌株和质粒
3.2.2 培养基和培养条件
3.2.3 试剂和仪器
3.2.4 分子生物学相关操作技术
3.3 研究结果
3.3.1 tetH基因簇的比较分析
3.3.2 tetH基因簇中的启动子分析
3.3.3 tetH基因簇中可能的启动子功能的验证
3.3.4 cDNA末端快速扩增结果
3.4 结果讨论
第四章 嗜酸性喜温硫杆菌中双组分调控系统RsrS-RsrR编码基因的无痕敲除
4.1 引言
4.2 材料和方法
4.2.1 菌株和质粒
4.2.2 培养基和培养条件
4.2.3 试剂和仪器
4.2.4 分子生物学相关操作技术
4.3 研究结果
4.3.1 同源重组的自杀型质粒pSDUDI::rsrR(UHA+DHA)和pSDUDI::rsrS(UHA+DHA)的构建
4.3.2 自杀质粒的接合转移
4.3.3 单交换子的筛选
4.3.4 敲除株的筛选
4.3.5 回补菌株的构建
4.4 结果讨论
第五章 ΔrsrR、ΔrsrS生长曲线测定及连四硫酸盐剌激研究
5.1 引言
5.2 材料和方法
5.2.1 菌株和质粒
5.2.2 培养基和培养条件
5.2.3 试剂和仪器
5.2.4 分子生物学相关操作技术
5.3 研究结果
5.3.1 生长曲线差异对比
5.3.2 tetH基因簇的转录分析
5.4 结果讨论
第六章 ΔrsrR、ΔrsrS中硫代谢相关基因及调控系统基因的转录
6.1 引言
6.2 材料与方法
6.2.1 菌株和质粒
6.2.2 培养基和培养条件
6.2.3 试剂和仪器
6.2.4 分子生物学相关操作技术
6.3 研究结果
6.3.1 ΔrsrR敲除株与野生型在培养过程中硫代谢基因的差异表达
6.3.2 ΔrsrS敲除株与野生型在培养过程中硫代谢基因的差异表达
6.3.3 ΔrsrR敲除株与野生型在培养过程中双组分系统(TCS)及单组分系统(SCS)基因的差异表达
6.3.4 ΔrsrS敲除株与野生型在培养过程中双组分系统(TCS)及单组分系统(SCS)基因的差异表达
6.4 结果讨论
第七章 RsrS-RsrR对S4I途径的调控功能研究
7.1 引言
7.2 材料和方法
7.2.1 菌株和质粒
7.2.2 培养基和培养条件
7.2.3 试剂和仪器
7.2.4 分子生物学相关操作技术
7.3 研究结果
7.3.1 pET-22b-rsrR表达菌株构建
7.3.2 RsrR蛋白表达和纯化
7.3.3 目的片段的扩增
7.3.4 EMSA验证结果
7.3.5 DNase Ⅰ足迹实验
7.3.6 RsrR蛋白与调控序列体内验证质粒的构建
7.3.7 在ΔrsrR和野生型中互作验证质粒的gusA转录分析
7.4 结果讨论
第八章 RsrS和RsrR进化结构分析及其它非同源双组分调控蛋白(RR)的初步研究
8.1 引言
8.2 材料和方法
8.2.1 菌株和质粒
8.2.2 培养基和培养条件
8.2.3 试剂和仪器
8.2.4 分子生物学相关操作技术
8.3 研究结果
8.3.1 进化树分析
8.3.2 蛋白结构分析
8.3.3 tetH启动子序列与其它双组分调控蛋白(RR)的互作研究
8.3.4 RsrR蛋白关键氨基酸位点的分析
8.3.5 RsrS-RsrR调控S4I途径的基本模型的提出
8.4 结果讨论
全文总结与展望
附录
参考文献
攻读学位期间学术成果
致谢