哮喘患者气道上皮与血浆中IL-25的表达与诱导痰中嗜酸性粒细胞水平的关系

摘要

第一部分哮喘患者气道上皮与血浆中IL-25的表达与诱导痰中嗜酸性粒细胞水平的关系
　　目的：探讨哮喘患者气道上皮及血浆中IL-25的表达与诱导痰中嗜酸性粒细胞水平的关系。
　　方法：经纤维支气管镜刷检获得气道上皮细胞，用 Trizol一步法提取 mRNA,用Real-time PCR定量检测气道上皮细胞中IL-25的mRNA表达。静脉采血后分离血浆，用 ELISA法检测血浆中 IL-25的浓度。用高渗盐水雾化获得诱导痰，DTT裂解痰液后，滤液离心获取细胞沉淀，采用刘氏染液染色后显微镜下进行细胞分类计数。
　　结果：我们收集了21名正常对照者和43名哮喘患者的肺功能、纤支镜刷片、诱导痰和外周血标本。结果发现哮喘患者气道上皮中及血浆中IL-25表达高于正常对照组，但存在部分哮喘患者其表达并没有明显增高，我们根据气道上皮中IL-25的表达高低将哮喘组又进一步分为了IL-25 high和IL-25 low两组。分析发现IL-25 high组诱导痰中的嗜酸性粒细胞高于IL-25 low组。气道上皮细胞IL-25表达水平高的哮喘患者血浆中 IL-25水平显著增高，诱导痰中嗜酸性粒细胞高（>3％）者其血浆中IL-25的水平显著高于诱导痰中嗜酸性粒细胞低（≤3%）者。
　　结论：哮喘患者气道上皮中IL-25的表达高者诱导痰中嗜酸性粒细胞比例增高且血浆中IL-25的水平也增高。嗜酸性粒细胞型哮喘患者血浆中IL-25浓度高于非嗜酸性粒细胞型哮喘患者，血浆中IL-25的浓度可能用于预测气道的嗜酸性粒细胞性炎症。
　　第二部分 CDH26在HDM和IL-13刺激的MLE12小鼠肺上皮细胞中的表达
　　目的：探讨CDH26在屋尘螨和IL-13刺激的小鼠肺上皮MLE12细胞中的表达变化及CDH26-shRNA质粒的筛选。
　　方法：采用屋尘螨干预MLE12细胞6h，24h，48h后收集细胞，用Real-time PCR定量检测 CDH26在不同时间点的基因表达变化。用 IL-13干预 MLE12细胞48h后同样采用Real-time PCR定量检测CDH26的表达。将设计出的3个CDH26-shRNA质粒进行扩增、提取、测序后，采用Lipofectamine2000的方法转染至MLE12细胞，6h后再加入刺激因子IL-13，培养48h后收集细胞采用Real-time PCR定量检测CDH26的表达。
　　结果：屋尘螨干预MLE12细胞6h CDH26的表达无明显变化，在24h和48h其表达出现了明显的升高。IL-13干预MLE12细胞48h CDH26的表达同样出现了明显的上调。通过对MLE12细胞的转染筛选出了（2）号CDH26-shRNA质粒具有明显的抑制CDH26表达的效果。
　　结论：屋尘螨和IL-13干预MLE12细胞都可引起CDH26的表达上调。通过RNA干扰技术可以抑制CDH26的表达。

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第一部分 哮喘患者气道上皮与血浆中IL-25的表达与诱导痰中嗜酸性粒细胞水平的关系

前言

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 CDH26在HDM和IL-13刺激的MLE12小鼠肺上皮细胞中的表达

前言

材料和方法

结果

讨论

参考文献

综述: 上皮细胞因子IL-25、IL-33与支气管哮喘

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