维甲酸受体α和类视黄醇X受体α在溃疡性结肠炎患者和小鼠结肠炎模型中的表达及其在炎症中的作用

摘要

目的：探讨维甲酸受体α（RAR-α）及类视黄醇X受体α（RXR-α）在小鼠结肠炎模型及溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）患者肠道组织中的表达，并进一步研究全反式维甲酸缓解小鼠肠道炎症的作用机制。
　　方法：选取UC患者及健康对照者的肠道活检组织各18例，用于RT-PCR及Western blot检测RAR-α、RXR-α的表达。建立小鼠葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium, DSS）结肠炎的急性模型，并给予全反式维甲酸（all-trans inoid acid, ATRA）干预：将小鼠随机分成4组（每组有8只）：空白对照组、DSS（3％w/v）组、DSS+ATRA（100μg）组和DSS+ATRA（500μg）组。正常对照组小鼠饮用实验室中的正常饮用水，其余三组小鼠饮用含3%(w/v) DSS的饮用水，从小鼠饮用DSS第1天开始，DSS+ATRA100μg组、DSS+ATRA500μg组分别给予ATRA100μg/d、500μg/d灌胃7天至实验结束．空白对照组及DSS组每天给予同等体积的玉米油灌胃，第8天戊巴比妥钠麻醉，处死所有小鼠，收集小鼠肠道样本，用于病理学检测、髓过氧化物酶活性（MPO）的检测、实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、RAR-α、RXR-α的表达、免疫印迹法（Western blot）检测RAR-α、RXR-α的表达。小鼠的巨噬细胞系RAW264.7培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中（100kU. L-1青霉素、100kU. L-1链霉素）中，先给予不同浓度的ATRA干预1h后，再给予LPS刺激，培养24h后收集细胞。RT-PCR检测TNF-α、IL-1β、IL-6、RAR-α、 RXR-α的表达、Western blot检测RAR-α、 RXR-α的表达。
　　结果：在溃疡性结肠炎患者、小鼠结肠炎模型及LPS刺激的巨噬细胞中，RAR-α及RXR-α在基因及蛋白水平的表达均下调，且RAR-α及RXR-α表达的下调伴随有炎症因子表达的上调。给予维甲酸干预后，LPS刺激的巨噬细胞及小鼠结肠炎模型中的炎症因子表达水平下降，且RAR-α的表达水平增高；RXR-α在体内试验中表达也增加，在体外实验中表达却进一步减少。
　　结论：RAR-α、RXR-α在小鼠结肠炎模型及溃疡性结肠炎患者结肠组织中的表达的下降提示RAR-α、RXR-α可能与溃疡性结肠炎的发病有关，且ATRA可能通过诱导RAR-α、RXR-α受体表达的增加来缓解小鼠肠道炎症，因此干预此两种受体的表达有可能成为治疗溃疡性结肠炎新的靶点。