H3K79甲基转移酶DOT1L的表达对卵巢癌病人的预后价值及对卵巢癌播散和转移作用的机制研究

摘要

目的：表观遗传学在调节癌症恶性行为中扮演重要角色，本文主要研究表观遗传因子DOT1L及H3K79甲基化在卵巢组织中的表达情况，并探索DOT1L在卵巢癌恶性进展中的作用及可能的机制。
　　方法：用免疫组织化学技术检测DOT1L和H3K79甲基化分别在250例卵巢肿瘤原位组织和24例正常卵巢组织中以及53对原位转移配对卵巢肿瘤组织中的表达情况。利用Transwell技术，划痕实验，粘附实验和血管渗透性实验等检测DOT1L在体外对卵巢癌细胞转移的作用。利用表达谱芯片技术，染色质免疫共沉淀后DNA测序技术和生物信息学分析等方法寻找DOT1L促进卵巢癌转移的生物学过程，相关通路和DOT1L的下游靶基因。分别用卵巢癌原位移植瘤模型和长短期肺转移模型检测DOT1L在体内对卵巢癌转移的作用。
　　结果：DOT1L和H3K79甲基化在卵巢癌恶性组织中表达显著增高，并且DOT1L在卵巢癌转移灶中的表达明显高于其配对的原位组织。DOT1L高表达与卵巢癌病人较晚期的FIGO分期，较差的组织病理学分级和淋巴转移相关。DOT1L高表达提示预后不良，并且DOT1L的表达可以作为卵巢癌病人总生存时间和疾病无进展生存时间的独立预测因素。DOT1L在体外促进卵巢癌细胞迁移，侵袭，粘附和血管内皮细胞渗透性。DOT1L通过H3K79甲基化调控其下游基因SPARC的转录，参与调节多种如细胞外基质受体结合，细胞粘附以及穿内皮细胞迁移等转移相关的过程。体内实验证明DOT1L通过下游基因SPARC的功能分别促进卵巢癌腹腔转移和血性转移的潜能。应用小分子抑制剂SGC0946对卵巢癌原位移植瘤腹腔转移具有抑制效应。
　　结论：我们首次陈述了DOT1L高表达与重要的卵巢癌临床特征间的关系，并阐明DOT1L通过调节H3K79甲基化调控下游基因SPARC的转录，且SPARC蛋白的介导下促进卵巢癌转移的恶性行为，提示DOT1L可能成为卵巢癌预后预测和治疗干预的潜在靶点。

目录

声明

前言

实验方法

结果

1. DOT1L和H3K79甲基化在正常卵巢组织，良性，交界性和恶性卵巢肿瘤组织中的表达情况

2. DOT1L的表达与卵巢癌临床病理之间的关系

3. DOT1L高表达作为卵巢癌独立预后因素

4. DOT1L在原位转移配对的卵巢癌组织中的表达情况

5. DOT1L体外促进卵巢癌细胞转移的潜能

6. 表达谱芯片差异基因，GO和KEGG分析

7. DOT1L通过H3K79甲基化调控转移基因SPARC的转录

8. SPARC在卵巢癌中的促癌作用

9. DOT1L通过下游基因SPARC的功能体外促进卵巢癌细胞转移潜能

10. DOT1L通过下游基因SPARC的功能体内促进卵巢癌转移

讨论

参考文献

综述：H3K79甲基转移酶DOT1L在癌症进展中的研究及临床治疗的应用前景

英文缩略词全称及释义

华中科技大学博士学位论文创新点概述

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