不同激活方法对猪卵丘细胞核移植效果的影响

摘要

本文研究了不同激活方法对猪卵丘细胞核移植效果的影响。文章以体外成熟的猪卵母细胞为材料，通过胞质内注射方法将卵丘细胞移入卵母细胞4.5h后，以电脉冲、CHX和6-DMAP为人工刺激条件，单一激活和联合激活为基本激活方法，以重构胚的卵裂率和8细胞以上胚胎发育率为检测指标，研究了不同激活方法对猪体细胞核移植重构胚激活效果的影响，并与移核前进行预激活、移核4.5h后再进行单一电激活的试验组结果相比较研究激活问题，以寻找一种猪卵母细胞较好的人工激活方法，为提高猪核移植技术的成功率提供技术参考。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及学位论文版权使用授权书

第1章文献综述

引言

第2章实验材料与用具

2.1主要仪器、器具及主要试剂

2.1.1主要仪器、器具

2.1.2主要试剂

2.1.3主要器具的制备

2.2试剂的配制

第3章试验方法与实验设计

3.1试验方法

3.1.1猪卵母细胞的收集及体外成熟(IVM)

3.1.2卵母细胞的去核与注核

3.1.3重构胚激活

3.1.4核移胚的培养和体外发育

3.2实验设计

3.2.1电激活参数的优化选择

3.2.2不同放线菌酮浓度对核移植效果的影响

3.2.3不同6-DMAP浓度对核移植效果的影响

3.2.4不同联合激活方法对核移植效果的影响

3.2.5比较预激活去核卵母细胞对核移植效果的影响

第4章试验结果和分析

4.1电激活参数的优化选择

4.1.1最佳电场强度的优化选择

4.1.2最佳脉冲次数的优化选择

4.2不同放线菌酮浓度对核移植效果的影响

4.3不同6-DMAP浓度对核移植效果的影响

4.4不同联合激活方法对核移植效果的影响

4.5预激活去核卵母细胞对核移植效果的影响

第5章讨论

5.1最佳电场强度的优化选择

5.2最佳脉冲次数的优化选择

5.3不同放线菌酮浓度对核移植效果的影响

5.4不同6-DMAP浓度对核移植效果的影响

5.5不同联合激活方法对核移植效果的影响

5.6预激活去核卵母细胞对核移植效果的影响

第6章结论

参考文献

附 录

致 谢

发表文章