利用厚垣孢子改良木霉制剂

摘要

木霉(Trichoderma)是一类重要的生防真菌，目前已经商品化的制剂均为分生孢子制剂，但这些制剂具有货架期较短、防效受环境因子影响较大等缺点。厚垣孢子是木霉在逆境条件下产生的一种繁殖体，具有适应范围广、抗逆性强、耐储存等优点。用本试验室的高效拮抗木霉菌株Tr-92（对多种病原微生物具有良好的拮抗作用），建立木霉菌厚垣孢子发酵工艺，形成以厚垣孢子为主要成分的木霉制剂，以期达到延长木霉制剂的货架期、稳定并提高田间防效的目的。
　　利用单因素试验、正交试验方法对木霉Tr-92厚垣孢子发酵培养基及培养条件进行优化，筛选获得了适合此菌株厚垣孢子产生的最佳培养基组成为：草炭2.5％，玉米浆4.5%，葡萄糖2%，酵母膏0.5%；最佳培养条件为：接种量3%，装液量75mL/250 mL，转速为180 r/min，初始pH5.0，温度28℃，培养时间7 d。在此培养条件下，木霉Tr-92菌株厚垣孢子产量达到3.01×108个/mL。与优化前相比，厚垣孢子产量增长130.80％。通过培养条件优化确定了适合木霉Tr-92菌株产生厚垣孢子的条件，为高效木霉厚垣孢子生防菌剂的研制奠定了基础。
　　通过对载体、润湿剂、分散剂、紫外保护剂的的筛选及其生物相容性和可湿性粉剂的性能研究，建立哈茨木霉Tr-92厚垣孢子可湿性粉剂的制备方法。最佳配方为：厚垣孢子粉：29%，载体：硅藻土，润湿剂：十二烷基硫酸钠4%，分散剂：CMC5%，紫外保护剂：糊精1%。通过对厚垣孢子可湿性粉剂进行质量检测：润湿时间为58s，总悬浮率为78%，孢子悬浮率为85.27%，p H为6.92，含水量为2.16%，用湿筛法过200目筛测定样品细度为98%。该配方研制的各项指标均符合可湿性粉剂标准的要求。
　　测定了厚垣孢子和分生孢子在不同的保存条件下孢子数目和萌发率，制剂化有利于孢子数目和萌发率的提高，厚垣孢子可湿性粉剂的孢子数目和萌发率显著高于分生孢子。
　　通过盆栽试验和田间试验确定了木霉厚垣孢子可湿性粉剂的应用效果，在田间施用情况下，对灰霉病的防效厚垣孢子与化学农药的防治效果相当，显著好于木霉分生孢子制剂的防效。

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第一章 绪论

1 .1木霉菌概述

1 .2木霉菌的特点

1 .3木霉菌在生物防治中的作用

1 .4木霉菌的发酵研究现状

1 .5本文的研究背景、研究内容及研究目的

第二章 木霉Tr-92菌株厚垣孢子发酵条件的优化

2 .1引言

2 .2实验材料

2 .3实验方法

2 .4 结果与分析

2 .5 .讨论

2 .6小结

第三章 木霉厚垣孢子可湿性粉剂的研究

3 .1引言

3 .2实验材料

3 .3实验方法

3 .4试验结果

3 .5讨论

3 .6小结

第四章 木霉Tr-92厚垣孢子制货架期的测定及应用试验

4 .1 实验材料

4 .2 实验方法

4 .3 实验结果

4 .4 讨论

4 .5小结

第五章 结 论

参考文献

致谢

攻读学位期间所取得的相关科研成果