荧光PCR方法检测广西部分地区7岁以下儿童β地中海贫血基因型

摘要

目的应用荧光聚合酶链反应(fhlorescent polymerase chain reaction，荧光PCR) 方法，对广西南宁、柳州、百色地区7岁以下儿童进行β地中海贫血(地贫)基因分析，探讨荧光PCR方法用于β地贫诊断的实用性和准确性，及了解该地区学龄前儿童β地贫的发生率和基因型。 方法对南宁、柳州、百色地区7岁以下儿童共2261例，抽取静脉血，ACD抗凝；进行血常规检测，血红蛋白电泳及应用高效液相色谱分析进行HbA2、HbF定量；应用荧光PCR方法和基因扫描进行β珠蛋白基因检测。 结果 2261名儿童中，血红蛋白分析结果显示有125名HbA2增高者，经荧光PCR方法检测均为β地贫杂合子，β地贫发生率为5.53％。共检出CD41-42突变基因59例，CD17突变基因33例，TATA盒nt-28突变基因18例，IVS-Ⅱ-654突变基因7例，CD43突变基因3例，Hb E突变基因3例，CD71-72突变基因1例，及TATAbox nt-29突变基因1例。基因型频率依次为：CD41-42 47.2％、CDl7 26.04％、TATA盒nt-28 14.40％、IVS-Ⅱ-654 5.6％、CD43 2.40％、Hb E 2.40％、CD71-72 0.80％、TATA盒～nt29 0.80％。 结论 (1)荧光PCR方法可快速、准确检测B地贫基因型，其重复性高、无放射性物质的污染，结果清晰、分辨率高及易于保持，仅用少量的DNA便可完成检测，尤其适合大样本量的检测。(2)荧光PCR 方法与目前常用的RDB方法相比，具有操作简便，快速，准确，成本较低等优点。(3)广西南宁、柳州、百色地区的7岁以下儿童，β地贫发生率为5.53％。常见基因型为：CD41-42(-TTCT)，CDl7(A→T)，TATA盒nt-28(A→G)，IVS-Ⅱ-654(C→T)等。基因型频率为：CD41-42 47.2％、CDl7 26.40％、TATA盒nt-2814.40％、IVS-Ⅱ-654 5.6％、CD43 2.40％、Hb E 2.40％、CD71－72 0.80％及TATA龠nt-29 0.80％。

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结论

参考文献

综述:β地中海贫血的分子基础与常见的诊断方法

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