黑米花色苷提取物对血脂异常患者血脂和炎性因子的影响

摘要

本课题选择血脂异常患者作为研究对象进行干预试验，观察AREBR对受试者脂质水平及炎性因子的影响，进一步阐明其在防治心脑血管疾病方面的应用价值。 研究对象和方法： 1.AREBR胶囊的制备与成分鉴定 1.1 AREBR胶囊的制备采用本实验室已建立的醇溶液浸提法对黑米花色苷进行提取，经过碾磨米皮→乙醇浸提→浓缩蒸发→脱脂→吸附分离→解吸附→真空冷冻干燥等系列工序，得到紫黑色AREBR粉末，并将其制备成胶囊，规格为250mg／粒，主要成分为50mgAREBR+200mg预胶化淀粉(药用)。同时制备空白安慰剂胶囊，外观规格与AREBR胶囊一致，主要成分为250mg预胶化淀粉。 1.2 AREBR的成分鉴定用国标检验方法(比色法)分析AREBR的理化成分；用高效液相色谱仪(HPLC)初步判定AREBR的主要成分和含量；用高效液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)准确判定AREBR中各种花色苷物质的含量及其化学结构；采用分光光度法测定提取物的最终纯度。 1.3人群试验准备工作AREBR经毒理学试验证实是实际无毒级，未发现任何毒性反应；经卫生学检验，微生物指标符合国家保健食品标准；经功能学评价证实，在高脂动物和人群可以降低血胆固醇和甘油三酯水平，无明显副作用。已获得中山大学伦理委员会批准，开展人群试验。 2.研究对象 2.1研究对象的选取本课题在广州市多个社区以招募志愿者的形式进行研究。对象纳入标准为：年龄40～65岁；符合我国“血脂异常防治建议”对于原发性高脂血症诊断标准中的任一项或一项以上。剔除标准包括：继发性高脂血症；患糖尿病或糖耐量异常、心脑血管或肝肾系统重大疾病；试验前一个月内曾患有急慢性感染性疾病、自身免疫性疾病等；现正服用或近半年内曾服用过任何影响血脂或炎性因子的药物。 2.2研究对象的分组及处理本研究是单盲设计的随机对照试验。筛选符合条件的志愿者60名，将对象按入选顺序分别编号，按照性别、年龄等基本情况进行匹配，随机分入干预组和对照组，每组各30人。干预组对象给予AREBR胶囊，每日两次，每次两粒；对照组对象给予空白安慰剂胶囊，其服用方法与干预组相同。干预试验共12周，期间受试者保持平时的生活习惯，每2周随访一次。 3.研究内容及方法： 3.1问卷调查采用统一的调查表，由调查员询问研究对象，并根据其回答如实填写问卷。个人基本情况调查包括对象的一般情况、既往史、家族史、服药史、女性绝经等。生活方式调查包括吸烟、饮酒、运动习惯等。膳食调查采用连续三日的24小时膳食回顾调查。 3.2人体测量分别于干预前后由专人测量对象的身高、体重、腰围、腹围、臀围、血压等指标，并计算体质指数(BMI)和腰臀比(WHR)。 3.3指标检测干预前后分别抽取清晨空腹静脉血，分离血清。在日立7170型全自动生化分析仪上测定血脂六项，其中TG、TC、LDL-C、HDL-C采用酶法检测；ApoA和ApoB采用免疫透射比浊法；空腹血葡萄糖采用葡萄糖氧化酶法；胰岛素含量采用直接化学发光技术的两点夹层免疫法检测。计算内稳态模型评价指数(HOMA-R)。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)；血清高敏C-反应蛋白(hs-CRP)采用免疫透射比浊法。各指标检测均严格按照试剂盒说明书进行相应操作。 研究结果： 1.AREBR成分分析所得AREBR主要为花色苷成分，占43.2％。 2.研究对象的一般情况按照标准筛查后共有60名志愿者进入研究，期间对照组有2人中途退出，最终有58人完成干预。对照组共28人，男11人，女17人，平均年龄54.98±6.12岁；14.3％为吸烟者，10.7％有饮酒习惯；已绝经女性占76.5％。干预组共30人，男7人，女23人，平均年龄55.29±6.32岁；吸烟和饮酒者分别占13.3％，6.7％已戒烟；已绝经女性占73.9％。两组对象在一般情况各方面的构成比差异无统计学意义。 3.膳食及营养素摄入情况 3.1日均食物摄入量两组研究对象干预前的日均食物摄入量差异无统计学意义(P>0.05)，人均每日粮谷类、豆类摄入量分别为320.54±23.22g／d和21.93±4.43g／d；畜禽类达125.16±16.99g／d，鱼类摄入量为51.68±8.19g／d，蛋类和奶类摄入量分别为22.00±3.06g／d、108.36±84.44g，d；每日摄入蔬菜类462.21±49.40g/d、水果类191.36±36.67g／d：食用油摄入量为29.00±2.02g／d。 干预12周后，两组粮谷类摄入量均增加；对照组畜禽类摄入减少，干预组蛋类摄入增加。其它食物摄入量与干预前相比较并不存在显著性差异，组间亦无明显差别。 3.2日均能量及营养素摄入量两组对象干预前的日均能量及各营养素摄入量差异无统计学意义。人均每日能量摄入量为2117.61±140.44kcal/d，碳水化合物、蛋白质和总脂肪摄入量分别为268.25±24.27g／d、85.48±5.11g／d、83.91±3.59g／d，每日摄入胆固醇331.47±24.26mg／d、膳食纤维22.10±2.37g／d。组内干预前后比较差异无统计学意义，干预后两组间营养素摄入量亦无显著差异。 3.3膳食能量来源研究对象每日能量丰要由碳水化合物提供(50.17±1.78％)，蛋白质、脂肪的供能比分别为17.74±2.37％和31.67±1.61％。干预前后各营养素的供能比无显著改变。 4.人体测量指标两组对象干预前BMI均>25，WHR≥0.90。干预后人体测量指标均无明显变化。 5.血脂、血糖和胰岛素水平两组对象的血脂基线水平不存在明显差异。干预后AREBR组的TG和TC水平明显下降，降低值分别为0.44±0.65mmol／L、0.28±0.41mmol／L，降低率分别为13.46±22.17％、4.82±7.41％，与对照组比较差异均有统计学意义。干预前后HDL-C、LDL-C、ApoAl、ApoB、血糖、胰岛素及HOMA-R未见明显改变。以研究对象干预前后各项血脂指标的变化率作为因变量，分别以能量营养素摄入的变化值、体格指标变化值作为自变量，进行偏相关分析，结果显示血脂变化率与膳食营养因素和体格指标变化值之间不存在明显相关关系。 6.炎性因子水平 6.1干预前后炎性因子水平变化两组研究对象的血清炎症指标基线水平不存在显著差异。干预后AREBR组TNF-α和hs-CRP水平明显降低TNF-α水平由3.19±1.25 pg／mL降低至2.94±1.14 pg／mL，降低率5.27±4.31％；hs-CRP水平由2.08±1.36 mg／L下降至1.67±1.21 mg／L，下降率12.14±8.54％。与对照组比较差异有统计学意义。两组IL-6水平均有所下降，但干预前后及组间比较差异无统计学意义。 6.2干预前后炎性因子变化与血脂改变的相关关系相关分析结果显示，除IL-6降低率与TC、ApoAl变化率存在负相关关系外，其它炎性因子改变率与各项血脂指标变化率之间未发现存在显著相关关系。 6.3炎性因子与膳食、体格、血脂等因素的多重回归分析分别以血清炎性因子水平作为因变量，以年龄、性别、膳食因素、BMI、WHR、血脂作为自变量，进行多重回归分析，结果显示影响TNF-α、IL-6水平的主要因素是对象的BMI；hs-CRP水平则主要受到ApoB和WHR的影响。 6.4炎性因子水平与BMI的分层分析将研究对象按WHO的标准分为BMI<25(非超重)和BMI≥25(超重或肥胖)两个层次。超重或肥胖者的基线IL-6、hs-CRP水平均显著高于非超重者；该部分人群的TNF-α水平亦较高，但差异无统计学意义。干预后，非超重者的干预组与对照组炎性指标变化未见显著性差异；而超重或肥胖者的干预组TNF-α、hs-CRP降低值均明显高于对照组，组间IL-6水平变化则未见明显差异。 7.不良反应 试验期间，两组对象均未发生明显不良反应(如胃肠道症状、过敏反应等)。 结论： 1.经过12周的AREBR干预，能够有效降低血脂异常患者的血脂水平。 2.AREBR能够明显抑制血脂异常患者的炎性因子水平，改善炎症反应。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词汇表

声明

第1章前言

第2章对象和方法

第3章结果

第4章讨论

第5章结论

参考文献

致谢