母乳中瘦素对SGA新生雌鼠成年期肥胖预防作用机制研究

摘要

研究背景和目的:心血管疾病对人类健康构成严重威胁，预防肥胖已成为降低心血管疾病发病率的重要手段。小于胎龄儿（SGA）是心血管疾病、肥胖的高危人群，既往研究发现母乳中瘦素（Leptin）可预防SGA新生雌鼠成年期血脂异常、体重指数（BMI）升高，但具体机制未明。本研究在哺乳期给予SGA新生雌鼠STAT3抑制剂（NSC74859）以阻断Leptin-OBRb-JAK2/STAT3-SOCS3信号通路，观察母乳喂养对SGA雌鼠成年期肥胖预防作用是否被抑制，以验证母乳中瘦素通过该信号通路预防SGA雌鼠成年期肥胖的假设；检测下丘脑阿黑皮素原（POMC）、细胞因子信号转导抑制蛋白3（SOCS3）蛋白表达水平来阐述母乳中瘦素对SGA新生雌鼠成年期肥胖预防作用的机制。
　　方法:通过限制妊娠期饮食建立SGA新生鼠模型，由于不同性别成年大鼠体格差异较大，所以选定SGA新生雌鼠为研究对象。SGA和AGA新生雌鼠随机分为6个组：SGA雌鼠皮下注射NSC74859组（SSI）、SGA雌鼠溶剂对照组（SSC）、SGA雌鼠空白对照组（SBC）、AGA雌鼠皮下注射NSC74859组（ASI）、AGA雌鼠溶剂对照组（ASC）、AGA雌鼠空白对照组（ABC）。比较皮下注射NSC74859组与对照组雌鼠幼年及成年期后营养情况，分别在出生后18天、30天、90天、180天（对应婴儿期、青春期、成熟期、老年期）测量大鼠体重、腹围、BMI，然后将大鼠处死并提取下丘脑组织蛋白， Western blot检测下丘脑阿黑皮素原（POMC）、细胞因子信号转导抑制蛋白3（SOCS3）蛋白表达水平。
　　结果:SGA和AGA溶剂对照组与空白对照组比较各项检测指标差异均无统计学意义，说明该溶剂对新生大鼠生长无影响。SBC组体重、腹围均小于ABC组，90天前的BMI小于ABC组，但是180天时接近。SGA雌鼠给药组与对照组比较，体重、腹围、BMI成年期均大于对照组。提示SGA雌鼠给予NSC74859后出现成年期肥胖。ASI组与ASC组比较，两组体重、腹围均接近，但是180天时ASI组BMI大于ASC组。SBC组在18天、90天POMC蛋白表达水平较ABC组显著降低，SOCS3蛋白表达水平在90天前处于稳定低水平，但180天时SOCS3蛋白表达水平较ABC组显著降低。SSI组在18天时POMC、SOCS3蛋白表达水平较SSC组显著降低，30天时两组比较差异无统计学意义，但90天、180天又显著降低。SBC组与SSC组相似。
　　结论:母乳中瘦素对SGA雌鼠成年期肥胖的预防作用是由Leptin-OBRb-JAK2/STAT3-SOCS3信号通路介导。母乳中瘦素是通过上调POMC蛋白表达水平实现对SGA雌鼠成年期肥胖的预防作用。

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第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1实验材料

2.1.1动物

2.1.2主要试剂

2.1.3主要仪器

2.1.4实验器械的处理

2.2技术路线

2.3 实验方法

2.3.1 建立SGA新生大鼠模型

2.3.2动物实验分组及干预方式

2.3.3检测指标

2.3.4实验动物取材

2.3.5 Western-blot测定下丘脑POMC、SOCS3蛋白表达水平

2.4统计学处理

第三章 实验结果

3.1 SGA新生大鼠和AGA新生大鼠出生1天体重、腹围、BMI比较

3.2各时间点各组体重、腹围、BMI比较

3.3各时间点各组下丘脑POMC、SOCS3蛋白表达水平比较

第四章 讨 论

4.1 SGA新生大鼠模型的建立及SGA婴儿

4.2 NSC74859与JAK2/STAT3信号通路

4.3 瘦素与Leptin-OBRb-JAK2/STAT3-SOCS3信号通路

4.4 POMC与肥胖

第五章 结论

第六章 不足与展望

参考文献

硕士期间发表论文情况

致谢

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