（1）活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠;（2）糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽（BNP）的影响

摘要

一、目的： 通过hTSHR活化脾细胞免疫BALB／c小鼠建立起Graves病动物模型，进行活体直接转移重组质粒pcDNA3．1／hFasL基因治疗Graves病模型小鼠的研究。 方法和步骤： 第一阶段：将50只BALB／c小鼠随机分为A组40只和B组lO只，分别用重组质粒pcDNA3.1／hTSHR和空白质粒pcDNA3.1免疫，并在第3周和第6周各加强免疫1次。饲养期间A组小鼠意外死亡2只。第18周时分别提取A组和B组小鼠脾细胞，免疫另外48只同源小鼠，4周后建立起A1组38只小鼠(Graves病小鼠)和B1组1O只小鼠(对照小鼠)。 第二阶段：A1组中随机选取19只小鼠作为模型组，剩余19只A1组小鼠作为治疗组，B1组10只小鼠作为对照组。模型组小鼠不进行任何干预；治疗组和对照组小鼠经手术暴露甲状腺后，在其周围分别注射100ug重组质粒pcDNA3.1／hFasL和100ug空白质粒pcDNA3.1。手术1周后，治疗组和对照组小鼠腹腔内连续注射烟酰胺溶液7天。而后处死模型组、治疗组和对照组小鼠，测定三组小鼠血清TSH、TT4、TRAb浓度，并对甲状腺进行组织学观察。 结果： (1)血清TT4浓度比较：治疗组、模型组和对照组小鼠血清TT4浓度有显著差异(24.76±14.37Vs.60.77±31.86vs.19.39±7.45ng/m1，F=14.07，P<0.05)，两两比较发现：治疗组小鼠血清TT4浓度低于模型组(P<0.05)，而与对照组相比无显著差异(P>0.05)。 (2)血清TSH浓度比较：治疗组、模型组和对照组小鼠血清TSH浓度有显著差异(1.32±0.33vs.1.05±0.35vs.1.36±0.30ulU／ml，F=4.3．P<0.05)，两两比较发现：治疗组小鼠血清TSH浓度显著高于模型组(P<0.05)，而与对照组相比无显著差异(P>0.05)。 (3)血清TRAb浓度比较：治疗组、模型组和对照组小鼠血清TRAb浓度无显著差异(24.89±3.78vs.24.63±3.21vs.25.58±3.08，F=0.26，P>0.05)。 (4)光镜组织学观察：治疗组19只小鼠中有3只甲状腺滤泡明显增生，滤泡上皮细胞增多、变大呈立方形，滤泡腔内胶质含量较少等；模型组19只小鼠中有9只出现类似的甲状腺功能亢进病理改变；而对照组无小鼠出现上述病理改变。 (5)电镜组织学观察：治疗组小鼠甲状腺细胞内质网、线粒体数量较少，细胞浆大量胶质样的基质蓄积，细胞核内膜内侧有异染色质边集；模型组小鼠甲状腺内质网、线粒体增生，内质网丰富，呈层状排列，伴明显扩张，线粒体数量增多，伴体积扩大，形成巨大线粒体或者畸形线粒体；对照组未见异常。 结论： 活体直接转移重组质粒pcDNA3.1／hTSHR基因治疗Graves病动物模型小鼠效果良好。 二、目的： 研究糖尿病肾病和血脂异常分别对2型糖尿病患者BNP血浆浓度的影响。 方法： 77例2型糖尿病患者血浆BNP浓度及BNP可疑影响因素(包括年龄、性别、血压、体重指数、糖化血红蛋白、血脂、肾功能)等指标被测定后，对患者进行分组研究。分组方法分别为：根据肌酐清除率，将所有患者分为：肾功能正常组(Ccr>_90ml／min)、肾功能轻度减退组(90ml／min>Ccr>60ml／min)和。肾功能重度减退组(Ccr<60ml／min)；根据尿白蛋白排泄率，将所有患者分为：大量蛋白尿组(UAER>300mg/d)、微量蛋白尿组(300mg/d>UAER?_30mg/d)和正常蛋白尿组(UAER<30mg/d)；根据血脂，将所有患者分为：血脂正常组(TC、TG、HDL-C、LDL-C等均符合1999年亚洲-太平洋地区2型糖尿病患者血脂控制目标[1])和血脂异常组(TC、TG、HDL-C、LDL-C中的一个或多个指标不符合1999年亚洲-太平洋地区2型糖尿病患者血脂控制目标)。比较各组患者BNP浓度，分析糖尿病患者BNP组间差异的原因。 结果： 1.糖尿病患者BNP与肌酐清除率、尿白蛋白排泄率、年龄、糖化血红蛋白等有显著相关性(P<0.05)。 2.肾功能正常组、轻度减退组和重度减退组三组间患者BNP有显著差异(6.74-8.5vs.13.2±13.1vs.62.7±71.6pg／ml，F=14.5，P0.05)。 4.血脂异常组患者BNP与血脂正常组相比无显著差异(22.24±60.5vs.27.84±313pg/ml，P>0.05)。 结论： 1.肾功能、年龄、糖化血红蛋白等是2型糖尿病患者血浆BNP浓度的影响因素。 2.肾功能下降(肌酐清除率降低或者尿白蛋白排泄率升高)可引起2型糖尿病患者BNP血浆浓度升高，临床提示：糖尿病患者BNP浓度升高除考虑心衰、高血压等常见原因外，还需要考虑肾功能恶化的可能。 3.血脂异常对糖尿病患者BNP血浆浓度无显著影响，临床提示：BNP在糖尿病及其并发症中的临床应用价值，如评价糖尿病患者心功能、判断糖尿病患者预后、监测降糖药物副作用等，不受血脂影响。

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第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠摘要

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠英文摘要

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠前言

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠材料和方法

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠结果

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠讨论

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠结论

第一部分活体直接转移重组质粒pcDNA3.1/hFasL基因治疗Graves病模型小鼠参考文献

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响摘要

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响英文摘要

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响前言

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响材料和方法

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响结果

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响讨论

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响结论

第二部分 糖尿病肾病和血脂异常对2型糖尿病患者血浆脑钠肽(BNP)浓度的影响参考文献

文献综述(一)自身免疫性甲状腺疾病基因治疗的研究进展

文献综述(二)脑钠肽与内分泌疾病

致谢

硕士期间发表的论文