我国部分地区成人面部皮肤老化相关因素及香烟烟雾提取物与尼古丁致皮肤老化作用和机制的研究

摘要

本课题研究目的： 1、研究中国人面部皮肤衰老过程中皱纹和色素变化的特点，调查光暴露时间、吸烟和性别等因素与中国人面部皮肤衰老的关系。 2、探讨香烟烟雾提取物(CSE)和尼古丁对原代培养的皮肤成纤维细胞生长和本研究受2007年中华医学会一欧莱雅中国人健康皮肤研究项目资助(2007040809)3、观察CSE对皮肤成纤维细胞胶原合成的影响；明确CSE致皮肤成纤维细胞的氧化损伤机制。 研究方法： 1、采用面对面的现场问卷调查方式进行随机的调查，对被调查者的年龄、性别、吸烟和光暴露时间等信息进行采集。被调查者需进行面部拍照，采集图像。按照Jin Hochung的东亚人面部图像册对每个调查者的面部图像进。行比对分级。然后采用按照图像比对的方法对每个调查者的面部图像的皱纹和色素变化情况进行评分和分级。然后在SPSS 11.5软件包下对各影响因素进行统计学分析。 2、采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测CSE和尼古丁对体外皮肤成纤维细胞存活力的影响，并在光镜下和透射电镜下观察CSE作尉后的细胞形态和显微结构变化；绘制不同浓度的CSE和尼古丁作用于成纤维细胞的生长曲线：β一半乳糖苷酶染色方法检测CSE连续作用5代后成纤维细胞β-半乳糖苷酶的变化情况，并绘制正常培养5代和CSE连续作用5代后细胞的生长曲线；流式细胞仪检测不同浓度的CSE作用于成纤维细胞后细胞周期的变化情况。 3、用分光光度检测法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR>法澍定CSE对成纤维细胞培养基中分泌的胶原含量和Ⅰ型前胶原表达的影响；用分光光度法检测胞浆内活性氧(ROS)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。 研究结果发现： 1、色素斑和脂溢性角化的数目随着年龄的增长而增多；在50岁年龄段以上女性人群中色素斑的数目要比男性多，而在_60岁以上男性人群申脂溢性角化的数目要比女性更为普遍；年龄与皱纹改变、色素变化成正相关。在控制了年龄和性别之后，皱纹与色素改变存在着正相关。除年龄外，吸烟、光暴露时间和女性性别均是发生严重皱纹的危险因素。 2、CSE作用细胞后成纤维细胞呈典型的损伤形态；随着CSE浓度的增大和作用时间的延长细胞存活力明显下降，高浓度的尼古丁可以使成纤维细胞的存活力下降，而低浓度的尼古丁则促进成纤维细胞的增殖能力；细胞生长曲线示CSE各染毒组细胞的生长速度较对照组明显减慢，而低浓度的尼古丁作用的各组细胞生长速度较对照组明显增快；CSE染毒作用五代后的细胞经β-半乳糖苷酶呈显著阳性；CSE长期连续作用后的细胞生长曲线示细胞的生长速度明显减慢，对数生长期消失；细胞周期动力学显示随着CSE作用浓度的加大和作用时间的延长，G<,1>期、G<,2>期细胞数增加，S期细胞数减少。 3、CSE能够显著降低成纤维细胞分泌的可溶性胶原含量，上述抑制作用随着药物浓度的增高而增强；采用RT-PCR法对成纤维细胞Ⅰ型前胶原的着药物深度的增高增强；采用RT-PCR法对成纤维细Ⅰ型前胶原的mRNA进行检测，显示随着CSE浓度的增高其表达量降低：CSE作用于细胞后，细胞胞浆内ROS含量升高，SOD活性降低。 结论： 1、皱纹变化同色素改变一样是中国人皮肤老化的主要特征。吸烟，光暴露和女性性别是皱纹发生的危险因素。 2、CSE对体外培养的皮肤成纤维细胞具有损伤作用，对细胞的增殖和生长有一定的抑制作用；高浓度的尼古丁对皮肤成纤维细胞具有损伤作用，低浓度尼古丁对皮肤成纤维细胞的增殖有促进作用；CSE引起细胞DNA复制和有丝分裂障碍，对细胞的G<,1>期、G<,2>期有不同程度的阻滞。低浓度CSE长期的作用，可以促使原代培养的成纤维细胞迅速衰老。 3、CSE能够抑制皮肤成纤维细胞胶原的合成；CSE对成纤维细胞的损伤作用与氧自由基生成及其抑制细胞抗氧化能力有关。

目录

论文说明:中英文对照及缩略语

全文摘要

前言

第一部分我国部分地区成人面部皮肤老化特征以及面部皮肤皱纹相关危险因素的研究

第二部分香烟烟雾提取物和尼古丁对原代体外皮肤成纤维细胞促衰老化作用的探讨

第三部分香烟烟雾提取物对皮肤成纤维细胞胶原代谢影响和损伤机制的研究

第四部分全文总结

第五部分全文展望

论文相关综述 尼古丁与皮肤健康

综述一 尼古丁与皮肤健康

综述二 黑素细胞与外毛根鞘黑素细胞

综述三 毛囊与干细胞

致谢