“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型和技术改进

摘要

目的：参考“二袖套法”建立稳定的大鼠原位肝移植模型，并探讨大鼠原位肝移植模型的技术改进。 方法：选用体重相近的220只健康雄性SD大鼠作为供受体，共110对，随机分为Kamada“二袖套法”组(Ⅰ组)20对和改良Kamada“二袖套法”组(Ⅱ组)90对。分别参考Kamada“二袖套法”和改良Kamada“二袖套法”(改良的技术包括：高质量的获取和重建肝上下腔静脉，即供肝肝上下腔静脉后壁保留半层膈肌环，前壁不保留膈肌环，重建时，后壁采用膈肌环对膈肌环，前壁用静脉壁对膈肌环；改良胆管插管方法，即胆管支撑管从供肝胆管侧壁插入，重建时，弧形剪开有尾状叶胆管汇入的胆总管侧壁后插入。修整供肝时，完成门静脉袖套后，予4℃0.9％生理盐水5ml经门静脉袖套进行再灌注等)建立大鼠原位肝移植模型。比较两组在总手术时间，供体手术时间，受体手术时间，修肝时间，无肝期时间，冷缺血时间，移植大鼠24小时存活率和1周存活率之间的差异。实验数据采用SPSS10.0统计软件包进行x2检验分析，检验标准采用P=0.05。手术成功标准：大鼠关腹后去除固定、复温后能自行翻身、精神好主动进水、对刺激反应正常、存活24小时以上。本实验是由术者经过大鼠原位肝移植的手术训练，并制作出稳定的模型后实施。 结果：组Ⅰ完成20次大鼠原位肝移植模型建立，组Ⅱ完成90次大鼠原位肝移植模型建立，组Ⅰ和组Ⅱ总的手术时间分别为85min-122min(103.5min)和85min-120min(平均100min)，供体手术时间分别为28min-39.5min(平均32.5min)和30min-41min(平均34min)，受体手术时间分别为45min-59min(平均48min)和45min-56min(平均49.5min)，修肝时间分别为10min-20min(平均12.5min)和10min-22min(平均14.5min)，无肝期时间分别为16min-23min(平均17min)和15.5min-22min(平均17min)，冷缺血时间分别为49min-63min(平均54.5min)和50min-65min(平均55min)，上述数据经统计学分析差异无统计学意义(P＞0.05)。组Ⅰ和组Ⅱ手术成功率为75％(15/20)和193.3％(84/90)(P＜0.05),显示改良Kamada“二袖套法”的手术成功率高于Kamada“二袖套法”。1周存活率为93.3％(14/15)和94.0％(79/84)(0.05＜P＜0.10)。组Ⅰ中有1例存活超过200天，3例存活存活超过100天，组Ⅱ中有4例存活超过200天，18例存活超过100天。 结论：本实验成功对Kamada“二袖套法”进行了改良，改良的大鼠原位肝移植模型是一种操作更加简单、易行、且模型更加稳定的原位肝移植模型。改良的模型依然存在血管并发症，有待进一步改进。

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结果

讨论

小结

参考文献

附图及说明

致谢

综述 大鼠原位肝移植动物模型制作方法的研究进展