沙棘籽油、果油、全果油抗氧化活性研究

摘要

氧化应激扰乱了人体内正常的氧化还原状态，因此可能引发包括心血管疾病在内的许多人类慢性疾病。目前认为植物食品中的一些生物活性组分具有的抗氧化功能能够抑制这种干扰。沙棘在我国大量种植，分布面积广，而果实中含有多种具有活性的物质，如黄酮、VC等，具有潜在的应用价值。 本论文以以沙棘(SBT)三个不同部位提取的油脂（分别为SBT籽油、SBT果油和SBT全果油）为研究对象，测定了原料的理化性质、脂肪酸组成、体外抗氧化活性，然后建立小鼠快速衰老模型，通过观察体重的变化、行为学变化、相关生理生化指标的测定、肝组织病理切片以及抗氧化酶的mRNA的表达水平，研究了其体内的抗氧化活性。 首先按照我国食品国标测定了三种沙棘油的理化性质，酸价、过氧化值和皂化值均符合国家标准。采用GC法分析测定了沙棘油中的主要脂肪酸，包括5种长链脂肪酸(LCFA)，分别为C16∶0、C18∶0、C18∶1、C18∶2和C18∶3。其中含量差异最大的是不饱和脂肪酸C18∶2和C18∶3，SBT果油的C18∶2含量最丰富，SBT籽油的C18∶3含量最丰富。采用分光光度法测定总酚的含量，结果表明SBT籽油的含量高于其他两者。研究了三种原料的体外抗氧化活性，DPPH自由基清除的IC50值分别为SBT籽油4.09mg/mL，SBT果油为4.00mg/mL，SBT全果油为4.49mg/mL，三者差异不大，与总抗氧化能力方面，结果一致;在还原力方面，SBT籽油＞SBT全果油＞SBT果油;在ABTS自由基清除实验巾，三种沙棘油的IC50值分别为SBT籽油18.55mg/mL，SBT果油为10.90mg/mL，SBT全果油为15.14mg/mL，表明SBT果油的效果略好于其他两者。 使用D-gal建立小鼠快速衰老模型，以相同剂量(4mL/(kg·bw·d))灌胃饲养8周，并在第8周进行了行为学实验，实验组小鼠的记忆能力、探索能力等与模型组小鼠相比，有不同程度的恢复作用。随后测定了小鼠血清、肝组织和脑组织中相关生理生化指标，结果表明，三种沙棘油对氧化应激损伤有不同的缓解能力。 提取了小鼠肝脏组织的总RNA，进行反转录，检测了抗氧化酶GSH-Px和SOD的基因mRNA的表达水平，沙棘油对GSH-Px基因的表达有极显著的上调，而对于SOD基因，除SBT籽油外，均表现出了极显著的上调作用，从而延缓衰老。

目录

声明

摘要

1前言

1．1沙棘的简介

1．2沙棘中的主要活性成分

1．3沙棘油的提取工艺进展

1．3．1溶剂提取法

1．3．2超临界CO2萃取法

1．3．3亚临界萃取法

1．3．4压榨法

1．3．5水代法和水酶法

1．4沙棘油的生理活性

1．4．1抗炎作用

1．4．3增强免疫力作用

1．4．4降血脂、抗动脉粥样硬化作用

1．4．5保肝作用

1．4．6其他作用

1．5．1抗氧化简介

1．5．2抗氧化评价方法

1．6．1研究意义

1．6．2研究内容

2材料与方法

2．1实验材料

2．1．1实验原料和动物

2．1．2实验试剂

2．1．3实验仪器

2．2．1理化指标测定

2．2．2脂肪酸含量的测定

2．2．3总酚含量的测定

2．2．4体外抗氧化能力的测定

2．2．5三种沙棘油对D-半乳糖致衰小鼠体内抗氧化影响研究

2．2．6三种沙棘油对小鼠抗氧化酶基因表达的影响

2．3数据处理

3结果与讨论

3．1三种沙棘油理化性质比较

3．2三种沙棘油脂肪酸组成及含量比较

3．2．1脂肪酸标准品的色谱图

3．2．2三种沙棘油脂肪酸组成及含量比较

3．3．1没食子酸标准曲线

3．3．2三种沙棘油没食子酸当量

3．4．1 DPPH自由基清除能力

3．4．2还原能力

3．4．3总抗氧化能力

3．4．4 ABTS自由基清除能力

3．5三种沙棘油对D-半乳糖致衰小鼠体内抗氧化影晌研究

3．5．1实验期间小鼠体重的变化

3．5．2沙棘油对D-半乳糖致衰小鼠主要脏器的影响

3．5．2行为学实验

3．5．3生理生化指标

3．5．4小鼠肝脏组织病理切片观察

3．6三种沙棘油对小鼠抗氧化酶基因表达的影响

3．6．1 RNA纯度的鉴定

3．6．2 GSH-Px基因mRNA的相对表达量

3．6．3 SOD基因mRNA的相对表达量

4结论

4．1全文总结

4．2论文的创新点

4．3论文的不足之处

5 展望

参考文献

7攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢