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摘要
缩略词
第一章绪论
1．1癌症治疗概述
1．2痘苗病毒在癌症治疗研究现状
1．2．1痘苗病毒简介
1．2．2溶瘤痘苗病毒的改造
1．2．3溶瘤痘苗病毒在肿瘤治疗作用机理
1．2．4溶瘤痘苗病毒在肿瘤治疗中的应用
1．3凝集素概述以及在癌症研究中的应用
1．3．1凝集素简介
1．3．2凝集素在肿瘤研究中的应用
1．3．3海绵凝集素AVL的研究现状
1．4研究意义与创新点
1．4．1意义
1．4．2创新点
第二章实验材料和仪器
2．1实验材料
2．1．1主要细胞株，病毒株、菌株和质粒
2．1．2主要生化试剂
2．1．3实验主要溶液配制
2．2实验主要仪器设备
第三章实验方法
3．1分子实验
3．1．1引物合成
3．1．2分子实验常用实验方法
3．1．2质粒pCB-Flag-AVL的构建
3．2细胞实验
3．2．1细胞复苏
3．2．2细胞传代
3．2．3细胞计数
3．2．4细胞转染
3．3病毒包装实验
3．3．1溶瘤痘苗病毒的包装
3．3．2重组溶瘤痘苗病毒的筛选
3．3．3溶瘤痘苗病毒挑空斑挑取单克隆病毒
3．3．5溶瘤痘苗病毒的鉴定
3．3．6痘苗病毒的大量扩增及纯化
3．4．1 MTT法探究溶瘤病毒对肿瘤细胞的杀伤效果
3．4．2 Hochst33342染色实验
3．4．3结晶紫染色实验
3．5．1 TCIDS0法检测溶瘤痘苗病毒在肿瘤细胞中的复制
3．5．2 Western bolt检测oneoVV-AVL潜在的抗肿瘤细胞机制
3．5．3 MEK抑制剂U0126验证病毒复制能力
3．6动物实验部分
3．6．1验证oncoVV-AVL在小鼠体内抗肿瘤效果
3．6．2 HE染色
3．7统计学分析
第四章实验结果
4．1 OncoVV-AVL包装过程鉴定结果
4．1．2 pCB-Flag-AVL质粒鉴定
4．1．3溶瘤痘苗病毒oncoVV-AVL的鉴定
4．2细胞毒性实验检验携带AVL基因的溶瘤病毒抗肿瘤效果
4．2．1探究凝集素AVL在腺病毒中对不同肿瘤细胞的效果
4．2．2探究AVL在溶瘤痘苗病毒中对不同肿瘤细胞的效果
4．2．3结晶紫实验验证oncoVV-AVL抗肿瘤效果
4．4病毒复制实验探究oncoVV-AVL抗肿瘤效果
4．5 Western blot检测相关信号通路
4．6验证ERK活性对oncoVV-AVL复制的作用
4．7 oncoVV-AVL在小鼠体内验证抗肿瘤效果
第五章结论与讨论
参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢
