磁性纳米颗粒用于中成药中黄曲霉毒素的含量测定

摘要

黄曲霉毒素是国际癌症组织定义的Ⅰ类致癌物质，广泛存在于包括农产品、中药在内的植物及其制品中，严重威胁着人类健康。由于该物质的高毒性，其限量控制受到了政府的高度关注。然而，中药基质复杂，黄曲霉毒素含量极低，使得对于中药，尤其是中成药中的黄曲霉毒素的研究较少。在中药国际化程度的日益提高的大趋势下，对于中药安全性的监管有了更高的要求。探索一种高灵敏度适应于中药复杂体系的黄曲霉毒素含量测定方法显得尤为迫切。本论文针对中成药具有复杂的物质体系，且黄曲霉毒素含量极低这一特点，选取中成药不同剂型，以生脉饮（党参方）、芙朴感冒颗粒、藿香正气软胶囊等为范例，通过设计一系列功能化磁性纳米颗粒，以磁性固相萃取对样品中的黄曲霉毒素进行净化富集处理，进一步建立磁性固相萃取-高效液相色谱-荧光检测法测定其中黄曲霉毒素的含量。具体如下:
　　1.制备三种不同的功能化磁性纳米颗粒作为磁性固相萃取的吸附剂:
　　(1)Fe3O4磁性纳米颗粒采用共沉淀法制备，用(3-巯基丙基)三甲氧基硅烷(TMSPT)和2-氨基-5-巯基-1，3，4-噻二唑(AMT)修饰，通过粒度分析、红外光谱，扫描电镜等对制备的功能化磁性纳米颗粒进行表征，获得了目标AMT-TMSPT-MNPs磁性纳米颗粒;
　　(2)将获得的Fe3O4磁性纳米颗粒，以正硅酸乙酯(TEOS)和3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰，通过红外光谱，X射线衍射光谱的表征，获得了目标APTES-TEOS-MNPs磁性纳米颗粒;
　　(3)Fe3O4磁性纳米颗粒用正硅酸乙酯(TEOS)和双（巯基乙酸）乙二醇(EGBMA)修饰，通过红外光谱，扫描电镜的表征，获得了目标EGBMA-TEOS-MNPs磁性纳米颗粒。
　　将三种合成的功能性磁性纳米颗粒用于建立磁性固相萃取方法测定中成药中的黄曲霉毒素。对黄曲霉毒素的吸附性能和可回收性进行了考察，结果显示对照品的回收率均在90％以上，回收情况较好。
　　2.磁性固相萃取-高效液相色谱-荧光检测方法的建立。通过对吸附时间、洗脱溶剂种类、体积、溶液pH等条件的优化，最终，建立高灵敏度的对不同剂型中成药中黄曲霉毒素进行含量测定的方法。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词简表(Abbreviations)

1．1 研究背景

1．1．1 中药有毒有害物质分析测定的重要性和必要性

1．1．2 中药中黄曲霉毒素测定研究迫在眉睫

1．2 黄曲霉毒素的简介

1．2．1 黄曲霉毒素的结构

1．2．2 黄曲霉毒素的性质

1．2．3 黄曲霉毒素的危害性

1．3 国内外研究现状

1．3．1 黄曲霉毒素含量测定方法研究进展

1．3．2 磁性纳米颗粒的简介及其在微量成分分析中的研究进展

1．4 本文的研究思路和实验方案

1．4．1 研究思路

1．4．2 实验方案

第二章 磁性纳米颗粒AMT-TMSPT-MNPs用于生脉饮(党参方)中黄曲霉毒素B1的含量测定

2．1 引言

2．2 材料

2．2．1 实验仪器

2．2．2 实验试剂

2．3 方法与结果

2．3．1 磁性纳米颗粒的制备、修饰及表征

2．3．2 色谱条件

2．3．3 供试品溶液的制备

2．3．4 对照品溶液的制备

2．3．5 磁性纳米颗粒AMT-TMSPT-MNPs对黄曲霉毒素B1吸附性能的评价

2．3．6 磁性纳米颗粒的可回收性髓评价

2．3．7 对黄曲霉毒素B1的方法学研究

2．4 讨论

2．4．1 功能化磁性纳米材料的制备及萃取依据

2．4．2 磁性纳米颗粒萃取条件的优化

2．4．3 样品的含量测定

2．4．4 含量测定结果分析

本章小结

第三章 磁性纳米颗粒APTES-TEOS-MNPs用于芙朴感冒颗粒中黄曲霉毒素B1，B2的同时测定

3．1 引言

3．2 仪器与试药

3．2．1 实验仪器

3．2．2 实验试剂

3．3 方法结果

3．3．1 磁性纳米颗粒的制备、修饰及表征

3．3．2 色谱条件

3．3．3 供试品溶液制备

3．3．4 对照品溶液制备

3．3．5 磁性纳米颗粒对黄曲霉毒素B1，B2吸附性能的评价

3．3．6 磁性纳米颗粒APTES-TEOS-MNPs的可回收性能评价

3．4 方法学研究

3．4．4 稳定性试验

3．4．5 重复性试验

3．4．6 回收率试验

3．5 讨论

3．5．1 磁性纳米颗粒萃取条件的优化

3．5．2 样品的含量测定

3．5．3 含量测定结果分析

本章小结

第四章 磁性纳米颗粒EGBMA-TEOS-MNPs用于中药和中成药中黄曲霉毒素含量测定的实验研究

4．1 引言

4．2 仪器与试药

4．2．1 实验仪器

4．2．2 实验试剂

4．3 方法结果

4．3．1 磁性纳米颗粒的制备、修饰

4．3．2 磁性纳米颗粒的表征

4．3．3 色谱条件

4．3．4 中药供试品溶液制备

4．3．5 中成药供试品溶液制备

4．3．6 对照品溶液制备

4．3．7 磁性纳米颗粒对黄曲霉毒素B1，B2吸附性能的评价

4．3．8 磁性纳米颗粒EGBMA-TEOS-MNPs的可回收性能评价

4．4 方法学研究

4．4．1 线性范围、线性方程及相关系数

4．4．2 检测限和定量限

4．4．3 精密度试验

4．4．4 稳定性试验

4．4．5 重复性试验

4．4．6 回收率试验

4．5 讨论

4．5．1 功能化磁性纳米制备机理及萃取依据

4．5．2 磁性固相萃取条件的优化

4．6 样品含量测定及分析

4．6．1 样品含量测定

4．6．2 含量测定结果分析

4．6．3 3种磁性纳米颗粒与传统免疫亲和柱法对样品前处理的比较

本章小结

总结与展望

硕士期间发表的论文和专利

参考文献