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英文文摘
第一章文献综述
1 防御素
2 甜蛋白
3 pET表达系统
4 甲醇酵母表达系统
本课题研究内容、目的和意义
第二章人β防御素3基因表达载体的构建及其在大肠杆菌中的克隆表达
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果
2.1 hBD3基因的构建
2.2 重组质粒pUCmT-hBD3的鉴定
2.3 重组表达载体pET-hBD3的构建与鉴定
2.4 目的基因的表达与检测
2.5 目的蛋白的纯化
2.6 防御素蛋白的活性检测
3 讨论
第三章植物des-pGlul-Brazzein基因表达载体的构建及其在大肠杆菌中的克隆表达
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果
2.1 des-pGlul-Bra基因的构建
2.2 重组载体pUCmT-Bra的鉴定
2.3 表达载体pET-Bra的鉴定
2.4 目的基因的表达与检测
2.5 目的蛋白的纯化
2.6 des-pGlul-Brazzein的甜度测定
3 讨论
第四章人β防御素3与植物甜蛋白des-pGlul-Brazzein嵌合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果
2.1 嵌合基因hBD3-Bra的构建
2.2 重组质粒pUCmT-hBD3-Bra的鉴定
2.3表达载体pET-hBD3-Bra的鉴定
2.4 嵌合基因hBD3-Bra的重组表达与检测
2.5 目的蛋白的纯化
2.6 目的蛋白的活性检测
3 讨论
第五章BL21-pET-hBD3的摇瓶发酵工艺研究
1 材料与方法
1.1 菌株与培养基
1.2 实验方法
2 结果
2.1 最佳装液量、接种量和初始pH的确定
2.2 BL21-pET-hBD3以不同IPTG浓度和温度诱导不同时间的结果
2.3 BL21-pET-hBD3以不同乳糖浓度和温度诱导不同时间的结果
2.4 BL21-pET-hBD3在不同温度下分别以IPTG和乳糖诱导的结果
3 讨论
第六章BL21-pET-Bra的摇瓶发酵工艺研究
1 材料与方法
1.1 菌株与培养基
1.2实验方法
2 结果
2.1 最佳装液量、接种量和初始pH的确定
2.2 BL21-pET-Bra以不同IPTG浓度和温度诱导不同时间的结果
2.3 BL21-pET-Bra以不同乳糖浓度和温度诱导不同时间的结果
2.4 BL21-pET-Bra在不同温度下分别以IPTG和乳糖诱导的结果
3 讨论
第七章BL21-pET-hBD3-Bra摇瓶发酵工艺研究
1 材料与方法
1.1 菌株与培养基
1.2 实验方法
2 结果
2.1 最佳装液量、接种量和初始pH的确定
2.2 BL21-pET-hBD3-Bra以不同IPTG浓度和温度诱导不同时间的结果
2.3 BL21-pET-hBD3-Bra以不同乳糖浓度和温度诱导不同时间的结果
2.4 BL21-pET-hBD3-Bra在不同温度下分别以IPTG和乳糖诱导的结果
3 讨论
第八章人β防御素3真核表达载体的构建
1 材料与方法
1.1实验材料
1.2 实验方法
2 结果
2.1 hBD3基因的构建
2.2 重组质粒pUCmT-hBD3的鉴定
2.3 表达载体pPIC9K-hBD3的鉴定
3 讨论
第九章植物des-pGlul-Brazzein基因真核表达载体的构建及其在甲醇酵母中的表达
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果
2.1 des-pGlul-Brazzein的基因合成
2.2 重组质粒pUCmT-Bra的鉴定
2.3表达载体pPIC9K-Bra的鉴定
2.4 GS115-pPIC9K-Bra的筛选和鉴定
2.5 GS115-pPIC9K-Bra的诱导表达
3 讨论
第十章人β防御素3与植物甜蛋白des-pGlul-Brazzein嵌合基因的合成及其在甲醇酵母中的表达
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果
2.1 hBD3-Bra基因合成
2.2 重组质粒pUCmT-hBD3-Bra的鉴定
2.3表达载体pPIC9K-hBD3-Bra的鉴定
2.4 GS115-pPIC9K-hBD3-Bra的筛选和鉴定
2.5 GS115-pPIC9K-hBD3-Bra的诱导表达
3 讨论
结论及后续研究展望
参考文献
致谢
附：个人简历及攻读博士学位期间发表的论文
