杀虫蛋白在Bt水稻—植食者—蜘蛛食物链中的传递规律及对稻田代表性蜘蛛的影响

摘要

1、杀虫蛋白在Bt水稻-植食者-天敌食物网中的传递规律
　　 综合应用机动吸虫器和扫网法子Bt稻田采集节肢动物,鉴定后进行ELISA检测Cry1Ab蛋白含量。结果表明在大多数植食性昆虫(如黑尾叶蝉、褐飞虱等)体内检测到了Cry1Ab蛋白,而且在多种寄生蜂和捕食性天敌体内也能检测到。这说明Cry1Ab可以通过植食者传递至更高的营养层。天敌对Cry1Ab的取食有可能是直接取食Bt水稻,也有可能是取食了其他体内含有Cry1Ab蛋白的节肢动物。不同节肢动物暴露于Cry1Ab蛋白的程度,在将来对非靶标节肢动物进行安全评价时应该作为参考。
　　 2、转Bt基因水稻对拟环纹豹蛛生长发育及免疫的影响及其机理的研究
　　 比较分析Bt水稻对拟环纹豹蛛生长发育和繁殖能力的影响。结果表明,Bt水稻对拟环纹豹蛛的存活率、若蛛历期和繁殖力都没有显著影响。通过对拟环纹豹蛛血细胞数量、包囊率和PO活性的检测,虽然杀虫剂显著降低了拟环纹豹蛛的血细胞数量和包囊率,但Bt水稻未对拟环纹豹蛛的免疫功能产生显著的影响。BBMV和Cry1Ab的结合实验表明拟环纹豹蛛的BBMV上没有Cry1Ab蛋白的受体,这可能是拟环纹豹蛛不受Bt水稻影响的原因所在。
　　 3、转Bt基因水稻对拟环纹豹蛛控害能力和功能反应的影响
　　 采用ELISA和PCR方法检测了拟环纹豹蛛中肠褐飞虱的阳性率。结果表明,拟环纹豹蛛的褐飞虱平均阳性率为40％,Bt稻田和对照稻田之间没有显著差异。功能反应的研究结果表明,来自Bt稻田和对照稻田的拟环纹豹蛛在同一猎物密度下,对褐飞虱的捕食量无显著差异,且它们的功能反应同属于HollingⅡ型反应,瞬时攻击率和处理时间都无显著差异。
　　 4、用于评价蜘蛛猎物结构的LDR芯片制备及其初步应用
　　 我们首次介绍了一种新方法,基于LDR可对同时追踪蜘蛛中肠15种猎物的灵敏有效的方法。我们验证了它的高特异性和高灵敏度。我们还进行了田间试验,对不同的蜘蛛中肠内容物进行分析可以追踪它们猎物的多样性。来自Bt稻田和对照稻田的数百个蜘蛛样品支持了该技术的可靠性。这些结果意味着不仅在转基因水稻领域,在其他领域如外来生物入侵也可灵活的应用PCR-LDR进行捕食者和猎物之间的生态学研究。