高氧诱导小鼠视网膜新生血管过程中不同细胞因子mRNA表达水平的检测

摘要

目的：
　　 研究高氧诱导小鼠视网膜新生血管发生过程中血管内皮生长因子(VEGF)，成纤维细胞生长因子(bFGF)，内皮抑素(ET)和乙酰肝素酶(HPA)在视网膜中的表达。
　　 方法：
　　 实验组将21只新生7天幼鼠放于体积分数约75％的高氧环境中饲养5天，再置于正常环境中饲养。另外21只新生幼鼠在正常环境中饲养作为正常对照组。分别在小鼠出生后第12、17、25天通过高分子量荧光素血管造影观察视网膜血管形态变化.并取小鼠视网膜，通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测不同时间点视网膜组织中VEGF，bFGF，ET，HPAmRNA水平的变化，比较高氧组与对照组的差异。
　　 结果：
　　 高氧组小鼠在生后12天时主要表现为后级部大片无灌注区，视网膜血管管径变细，分支减少，仅在周边部网膜形成少量血管网，正常对照组血管分布均匀，走形正常；而在生后17天时，高氧组小鼠血管走形迂曲紊乱，可见大量新生血管存在，对照组血管则均匀分布于整个视网膜；生后25天时高氧组血管分布较前均匀，但仍存在一定量的新生血管。另外生后3个不同时间点高氧组VEGF、bFGF和HPAmRNA表达水平逐渐增高，与对照组比较差异有统计学意义(F=113.608，P=0.000,F=59.235，P=0.000,F=188.493，P=0.000)。而ETmRNA表达水平逐渐降低，与对照组比较差异有统计学意义(F=32.365，P=0.000)。
　　 结论：
　　 应用75％浓度的高氧可成功诱导小鼠视网膜新生血管形成，在新生血管形成过程中VEGF、bFGF、HPA作为进视网膜新生血管生长的重要因子，其mRNA表达水平升高；而ET作为抑制视网膜新生血管生长的细胞因子，其mRNA表达水平降低。