三种中药有效成分对小鼠2-细胞胚胎体外培养抗氧化作用及冷冻胚胎移植效果研究

摘要

本研究主要探讨mCZB分别添加黄芩苷(Baicalin，Bai)、川芎嗪(Ligustrazine，Lig)、小檗碱(Berberine，BR)对小鼠2-细胞胚胎体外发育抗氧化作用的影响，并比较各组胚胎冷冻解冻效果及冷冻胚胎移植妊娠率和产仔率等，以进一步探讨利用三种中药有效成分改善小鼠早期胚胎体外培养微环境、提高体外培养胚胎质量和移植胚胎的发育潜力，为更好地改进哺乳动物胚胎培养液成分和培养条件提供可借鉴的资料和途径。 试验一：以mCZB添加抗生素为对照组，分别添加4μg/mlBai、0.5μg/mlLig和0.1μg/mlBR为试验组，比较各组胚胎孵化率、微滴中一氧化氮(Nitricoxide，NO)和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量及孵化胚胎的细胞数量。结果：各试验组胚胎孵化率，Bai组(80.2％，81.3％)、Lig组(78.9％，77.6％)及BR组(76.7％，71.6％)极显著高于对照组(50.7％，47.8％)(P＜0.01)。各组间NO含量，72h较24h均有减少，而120h又均有增加且最高。各组间MDA含量，72h和120h与24h比较呈现增加趋势，除120hBai组，对照组均高于试验组。孵化胚胎细胞计数结果显示，BR组、Lig组和Bai组(87.2±8.6，83.9±7.7，81.9±6.2)与对照组(77.4±5.6)差异极显著(P＜0.01)。表明，三种中药有效成分均能显著促进小鼠早期胚胎体外发育及胚胎细胞增殖，并对NO和MDA含量有一定影响。 试验二：以试验一为基础，2-细胞胚胎体外培养至桑椹、囊胚期进行常规冷冻，比较各组胚胎冷冻解冻效果及两种程序对胚胎冷冻解冻的影响。结果：冷冻解冻桑椹胚体外培养8～14h囊胚发育率，程序一中Bai组(65.8％)显著高于对照组(48.6％)和BR组(46.7％)(P＜0.05)，Lig组(81.1％)极显著高于对照组(48.6％)和BR组(46.7％)(P＜0.01)；程序二中Bai组(80.6％)、Lig组(78.3％)极显著高于对照组(55.2％)和BR组(47.6％)(P＜0.01)。冷冻解冻囊胚体外培养6～8h囊胚发育率，程序一中各组间无显著差异(P＞0.05)；程序二中，中药有效成分各组间差异不显著(P＞0.05)，但均显著高于对照组(61.2％)(P＜0.05)。两种冷冻程序冷冻效果差异不显著(P＞0.05)。表明，添加Bai、Lig对提高胚胎体外发育质量效果明显，显著提高了冷冻胚胎发育率。 试验三：以试验二为基础，将各组冷冻解冻胚胎培养发育至囊胚期进行子宫移植。结果：移植妊娠率以Bai组(56.3％)、Lig组(52.6％)和BR组(55.0％)均高于对照组(46.2％)；产仔率以Bai组(63.3％)、Lig组(67.3％)和BR组(60.5％)，均高于对照组(52.8％)，但差异不显著(P＞0.05)。 综上结果表明：三种中药有效成份Bai、Lig、BR能显著提高小鼠2-细胞胚胎体外发育质量，并有利于提高冷冻解冻后移植胚胎的发育潜力。

目录

文摘

英文文摘

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第一章文献综述

第二章试验部分

第三章结论

参考文献

附表

附图

致谢

作者简历