胰高血糖素对MIN6细胞胰岛素分泌的作用及cGMP信号通路的影响

摘要

目的:探讨不同浓度的胰高血糖素(glucagon，Glg)及葡萄糖(glucose，Glu)对MIN6胰岛β细胞株细胞内环磷鸟苷酸（cGMP）信号通路的影响及对该细胞株胰岛素(insulin，INS)分泌功能及细胞增殖活力的影响，为进一步揭示胰岛素分泌机制提供新的方向。
　　方法:不同浓度的葡萄糖(2.8mmol/l-低糖，16.7mmol/l-高糖）及胰高血糖素（100ng/l-低 Glg，500ng/l-中Glg，1000ng/l-高Glg）处理MIN6细胞，酶联免疫方法测定细胞内cGMP含量的同时测定细胞上清液中INS的含量，并用MTT法测定各组细胞增殖活力，并对实验数据进行统计分析。
　　结果:各组细胞内 cGMP含量比较：单纯葡萄糖处理组，高糖组较低糖及无糖组高（P<0.001）；单纯胰高血糖素处理组，高 Glg组较无 Glg组低（P<0.05)；低糖加不同浓度胰高血糖素处理组，高Glg组较无Glg组低（P<0.01)，中Glg组较无 Glu组低(P<0.05)；高糖加不同浓度胰高血糖素处理组，高 Glg组较无Glg组低（P<0.001)，中Glg组较无Glg组低（P<0.01)。各组细胞上清液中INS含量比较：单纯葡萄糖处理组，高糖组较低糖组及无糖组高（P<0.001，P<0.05)；单纯胰高血糖素处理组，高 Glg组较低Glg组高（P<0.001)；低糖加不同浓度胰高血糖素处理组，高Glg组较中、低 Glg组高（P<0.001)，中 Glg组较低Glg组高（P<0.001)；高糖加不同浓度胰高血糖素处理组，高Glg组较中、低Glg组高（P<0.001)，中Glg组较低Glg组高（P<0.001)；各组细胞增殖活力的比较：低糖加不同浓度胰高血糖素处理组，各组细活力改变无统计学差异（P>0.05）；生理浓度糖（5.6mmol/l）加不同浓度胰高血糖素处理组，低、中、高Glg组细胞活力较无Glg组高（P<0.05，P<0.001，P<0.01），低、中、高 Glg组间细胞活力改变无统计学差异（P>0.05）；高糖加不同浓度胰高血糖素处理组，高 Glg组细胞活力较中、低及无Glg组高（P<0.05，P<0.01，P<0.001），中、低及无Glg组间细胞活力改变无统计学差异（P>0.05）。
　　结论:胰高血糖素可能通过降低MIN6细胞内cGMP含量产生的同时提高MIN6胰岛β细胞株的增殖活力来促进MIN6细胞胰岛素的分泌。

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符号说明

第一章 引 言

第二章 材料及方法

1材料与设备

1.1主要试剂

1.2 主要仪器及设备

2 实验方法

2.1 MIN6细胞培养

2.2细胞分组

2.3酶联免疫吸附法测定各组细胞内cGMP和细胞上清INS含量

2.4四唑盐（MTT）检测不同浓度胰高血糖素及葡萄糖处理MIN6细胞增殖活力

3统计方法

第三章 结果

1 MIN6细胞形态学观察

2 不同浓度胰高血糖素及葡萄糖处理MIN6细胞内INS含量比较

3不同浓度胰高血糖素及葡萄糖处理MIN6细胞 cGMP含量比较

4 不同浓度胰高血糖素及葡萄糖处理MIN6细胞增殖活力比较

第四章 讨 论

1葡萄糖对MIN6细胞胰岛素分泌的影响

2.胰高血糖素对MIN6细胞INS分泌的作用及cGMP通路的影响

3胰高血糖素对MIN6细胞增殖活力的影响

4 展望

第五章 结 论

参考文献

文献综述

致谢

作 者 简 介

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