豚鼠心室肌细胞膜延迟整流钾通道电流（I）及L型钙通道电流（I）在缺血预适应过程中的变化的实验研究

摘要

该研究应用膜片钳全细胞记录技术,在模拟缺血及早期缺血预适应条件下对豚鼠心室肌单细胞的延迟整流钾电流I<,k>(分为快速激活成分I<,kr>和缓慢激活成分I<,ks>)和L型钙通道电流(I<,Ca,L>)进行分析.方法:用胶原酶Ⅰ分离出豚鼠心室肌单细胞.实验条件设定为:(1)无预适应的缺血模型:细胞经正常细胞外液灌流5min,记录正常状态离子通道电流为对照,再予模拟缺血细胞外液灌流10min,记录缺血状态离子通道电流.(2)缺血预适应模型:细胞经正常细胞外液灌流5min,记录正常状态离子通道电流为对照后,先予缺血细胞外液灌流3min,再予正常细胞外液灌流(再灌注)3min,如此重复操作2次作为缺血预适应刺激并记录离子通道电流,再予模拟缺血细胞外液灌流10min,记录预适应后的缺血状态离子通道电流.该实验共观察记录四组细胞:单纯缺血Ik组(n=14)、缺血预适应I<,k>组(n=10)、单纯缺血I<,Ca,L>组(n=12)和缺血预适应I<,Ca,L>组(n=11).结论:(1)急性持续心肌缺血使I<,k>增大,且以I<,kr>的增大为主.(2)缺血预适应的刺激抑制了持续缺血时I<,k>的开放,对I<,kr>的抑制更为显著.(3)急性持续缺血使内向I<,Ca,L>峰值电流减小,相应外向稳态电流I<,ss>增大,稳态激活曲线略右移,不影响最大激活电位和反转电位.(4)缺血预适应刺激仍使I<,Ca,L>峰值电流减小,即短暂缺血后的再灌注不能使减小的I<,Ca,L>峰值恢复,但限制了IP之后的持续缺血时I<,Ca,L>峰值进一步减低;IP刺激和之后缺血时的I<,ss>均保持正常,稳态激活曲线均比正常略右移,均不影响最大激活电位和反转电位.(5)缺血预适应对I<,k>和I<,Ca,L>的抑制可限制细胞过度的钾外流和钙内流,IP使I<,ss>正常化有助于稳定静息膜电位,可能与持续缺血时对心肌的保护作用有关.

目录

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

文献综述 心肌缺血/再灌注过程中主要的离子通道电流

综述参考文献

致谢