人端粒保护蛋白（hPOT1）在胶质瘤中的表达水平与端粒酶抑制剂对肿瘤影响的初步研究

摘要

目的：采用荧光定量RT-PCR 方法，将不同级别脑胶质瘤标本、正常脑组织标本中hPOT1的表达水平进行比较，并研究其与端粒长度之间的相关性。为进一步探讨胶质瘤中端粒长度的调控机制、胶质瘤的发生机制提供理论基础；探讨其能否作为判断胶质瘤生物学行为和预后的指标；为今后临床应用分子生物学手段或基因治疗肿瘤提供资料。为更灵敏、更特异的分子肿瘤标志物的临床应用提供理论依据。采用流式细胞仪，对3‘叠氮胸苷及棉酚处理后的C6及TJ905肿瘤细胞增殖指数进行了测定，初步研究了端粒酶抑制剂对胶质瘤的影响。 方法：采集53例脑胶质瘤手术切除标本，8例正常脑组织。通过荧光定量RT-PCR方法检测标本中hPOT1的表达，使用ACTB基因作为内参照。应用人的端粒序列特异性探针地高辛标记的(CCCTAA)3进行Southem杂交检测脑胶质瘤细胞的端粒长度。对C6及TJ905细胞进行培养后，以棉酚或端粒酶抑制剂3‘叠氮胸苷(AZT)进行处理，利用流式细胞技术测定其增殖指数。 结果：采用SPSS 11.0 统计软件，对测得数据作对数变换后进行方差齐性检验并利用 LSD(Least-Significant Difference)最小显著差法进行统计分析后发现，肿瘤组织标本中hPOT1的表达明显高于正常组织。Ⅲ/Ⅵ级胶质瘤标本中hPOT1的表达高于Ⅰ/Ⅱ级胶质瘤标本中hPOT1的表达，二者之间有显著性差异(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ级之间以及Ⅰ/Ⅱ级之间没有明显的相关关系。随着端粒长度的缩短hPOT1的表达水平升高 (r=-0.963，P<0.05)。经3‘叠氮胸苷(AZT)或棉酚处理后，C6及TJ905的增殖指数均大为降低，同时发现棉酚很可能是一种新型的端粒酶抑制剂。 结论：POTl表达水平升高在不同级别的胶质瘤中均有体现，其升高程度在不同级别胶质瘤中是不同的，反映了肿瘤的增殖潜能不同。POT1表达水平与端粒长度之间有明显的相关关系，在一定程度上证明hPOT1在调节端粒长度以及端粒功能的维持方面可能起着重要作用。端粒酶抑制剂有可能作为新的化疗药物对胶质瘤起到一定的治疗作用。棉酚有可能是一种新型的端粒酶抑制剂。

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文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语

声明

第一部分人端粒保护蛋白（hPOT1）在胶质瘤中的表达水平

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分端粒酶抑制剂对胶质瘤影响的初步研究

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述端粒保护蛋白复合体的研究进展

致谢