唐山市2型糖尿病患者瘦素及瘦素受体基因多态性及其与相关因素的交互作用对下肢动脉病变的影响

摘要

目的
　　2型糖尿病（T2DM）合并下肢动脉病变（Lower extremity arterial disease， LEAD）是糖尿病的常见并发症，与非糖尿病患者相比，2型糖尿病患者LEAD患病风险明显增加，且发病早，病变重，治疗难度大，是一种由环境和遗传因素共同作用的疾病。基因多态性，以及许多非遗传因素（如年龄、糖尿病病程、吸烟、血脂异常、高血糖、高血压）在其发生中扮演着重要角色，但研究结果不一致。目前多数研究表明瘦素（Leptin，LEP）与瘦素受体（Leptin receptor， LEPR）基因多态性与肥胖、高血压、心脑血管疾病密切相关。目前尚无关于LEP与LEPR基因多态性及与非遗传因素交互作用对下肢动脉病变的影响的报道。
　　对象与方法
　　一、研究对象的选择
　　选取2015年5月至2016年11月于华北理工大学附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者789例为研究对象，LEAD人数为380例，非LEAD人数为409例。
　　二、实验室检测
　　抽取受试者空腹静脉血8ml，检测总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）和糖化血红蛋白（HbAlc）及瘦素（LEP）。抽取静脉血3ml于EDTA抗凝管内，提取DNA，以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测瘦素（LEP）基因G2548A位点、rs3828942位点，瘦素受体（LEPR）基因Gln223Arg位点、Prol019Pro位点多态性。
　　三、统计学分析
　　以Epidata3.0录入数据库，SPSS17.0进行数据分析。定量资料以（-x± s）表示，两组间比较采用t检验，定性资料比较采用?2检验。多因素logistic回归分析LEAD发病的危险因素。叉生分析法分析LEP及LEPR基因各基因位点基因与基因、环境与基因交互作用对LEAD的影响。
　　实验结果
　　一、环境因素与LEAD的关系
　　与非LEAD患者相比，年龄、性别、BMI、TG、HDL、吸烟差异无统计学意义（P＞0.05）；HbA1c、TC、LDL-C、Leptin、糖尿病病程、高血压、冠心病和脑梗死差异均有统计学意义（P＜0.05）。糖尿病患者LEAD患病率随着年龄增加而增加（χ2趋势=108.874，p＜0.001）。多因素logistic回归显示：年龄、高TC血症、高LDL-C血症、高HbAlc水平、糖尿病病程、高血压、冠心病、脑梗塞、leptin水平是LEAD患病的独立危险因素（P<0.05）。
　　二、瘦素及瘦素受体基因多态性与LEAD的关系
　　LEP基因2548G/A位点AA、AG、GG基因型在非LEAD组（44.3%、42.3%、13.4%）与LEAD组（34.7%、44.7%、20.5%）分布具有统计学差异（χ2=10.623， P=0.005）。LEAD组G等位基因频率（38.6%）高于非LEAD组（34.6%）（χ2=11.447， P=0.001）。多因素回归结果显示，携带LEP基因2548G/A位点GG基因型者发生LEAD的风险是AA基因型的1.998（95%CI：1.316~3.017）倍，GG因型可能是LEAD的易感基因型。
　　LEP基因rs3828942位点AA、AG、GG基因型在非LEAD组（45.5%、43.0%、11.5%）与LEAD组（43.2%、43.7%、13.2%）分布无统计学差异（χ2=0.703， P=0.704）。病例组G等位基因频率（35.0%）与非LEAD组（33.0%）相比，差异无统计学意义（χ2=0.697，P=0.404）。多因素分析表明不能认为rs3828942多态性与LEAD有关。
　　LEPR基因Gln223Arg位点AA、AG、GG基因型在非LEAD组（10.3%、39.4%、50.4%）与LEAD组（6.3%、35.3%、58.4%）分布具有统计学差异（χ2=6.922， P=0.031）。LEAD组G等位基因频率（76.1%）高于非LEAD组（70.0%）（χ2=7.195， P=0.007）。多因素回归结果显示，携带LEPR基因Gln223Arg位点GG基因型者发生LEAD的风险是AA基因型的1.816（95%CI：1.100~3.108）倍，提示GG基因型可能是LEAD的易感基因型。
　　LEPR基因Pro1019Pro位点GG、AG、AA基因型在非LEAD组分布（16.6%、44.3%、39.1%）与LEAD组（11.3%、41.6%、47.1%）具有统计学差异（χ2=7.200， P=0.027）。LEAD组A等位基因频率（67.9%）高于非LEAD组（61.2%）（χ2=7.599， P=0.006）。多因素回归结果显示，携带LEPR基因Pro1019Pro位点AA基因型者发生LEAD的风险是GG基因型的1.717（95%CI：1.109~2.658）倍，提示AA基因型可能是LEAD的易感基因型。
　　三、基因-基因交互作用对LEAD影响的分析
　　本次研究的LEP基因及LEPR基因的4种多态位点间未显示出基于相加模型的交互作用（P＞0.05）。
　　四、基因-环境因素交互作用分析
　　叉生分析中， Gln223Arg与LDL-C显示出基于相加模型的交互作用（U=2.658，P=0.008），交互作用指数（S）=5.310，两者可能具有正交互作用，交互作用归因比（AP）=0.570，纯交互作用归因比（AP*）=0.812，交互作用超额相对危险度（RERI）=1.918，交互作用比值比（ORint）=2.269。Gln223Arg与HbA1c显示出基于相加模型的交互作用（U=2.152，P=0.031），交互作用指数（S）=7.027，两者可能具有正交互作用，交互作用归因比（AP）=0.522，纯交互作用归因比（AP*）=0.858，交互作用超额相对危险度（RERI）=1.332，交互作用比值比（ORint）=2.074。本次研究的4种基因的多态位点与TC、高血压、冠心病、脑梗塞均未显示出基于相加模型的交互作用，P＞0.05。
　　结论
　　1、糖尿病人群中，高TC、高LDL_C、高HbAlc、糖尿病病程、年龄、高leptin、高血压、冠心病、脑梗塞是LEAD发生的独立危险因素。
　　2、LEP基因位点G2548A，LEPR基因位点Gln223Arg和Prol019Pro多态性是糖尿病人群LEAD患病的独立风险因素。
　　3、LEP基因2548G/A位点、rs3828942位点， LEPR基因Gln223Arg位点Pro1019Pro位点间未显示出基于相加模型的交互作用。
　　4、在对糖尿病患者LEAD的影响中，LEPR基因Gln223Arg位点与HbA1c、LDL-C存在基于相加模型的正交互作用。

目录

声明

缩略语/符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、唐山市2型糖尿病下肢动脉病变的环境因素的分析

1.1对象和方法

1.2结果

1.3讨论

1.4小结

二、瘦素及瘦素受体基因多态性与2型糖尿病下肢动脉病变的相关性研究

2.1对象和方法

2.2结果

2.3讨论

2.4小结

三、瘦素及瘦素受体基因多态性与其他因素的交互作用对糖尿病下肢动脉病变影响

3.1对象与方法

3.2结果

3.3讨论

3.4小结

全文结论

论文创新点

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:环境因素及基因多态性与糖尿病下肢血管病变关系的研究进展

致谢

个人简历