pUC18质粒DNA特殊拓扑结构实体的研究

摘要

从理论上讲,游离的超螺旋DNA可以有两种结构形式:互缠式超螺旋和线圈型超螺旋.前者已被实验所证实,而后者却缺乏直接证据.该文通过使用SDS-溶菌酶法裂解DNA拓扑酶野生型大肠杆菌HB101细胞,抽提出pUC18质粒DNA,经CsC1-EB平衡密度梯度超离心分离纯化得到超螺旋型DNA和松弛型DNA样品,在亲水性和疏水性两种展开介质中制作DNA样品的电镜标本,用透射电镜对其结构进行观察.通过实验,该文直观地显示了游离的超螺旋pUC18质粒DNA分子可以线圈型结构存在.进一步的研究发现了松弛型pUC18质粒DNA也可以具有线圈型结构,并给出了超螺旋型和松弛型pUC18质粒DNA分子线圈型结构的电镜表现及物理尺寸.实验事实提示,线圈型结构可能是游离的DNA分子在水溶液中的重要存在形式,DNA线圈之间可能存在非共价作用力以维持线圈型结构的稳定.此外我们还首次在电镜下观察到串珠状线圈型DNA多聚体等DNA特殊结构实体.该文的研究结果为进一步研究DNA在细胞内的凝集过程以及DNA的生物学功能提供了可靠依据.

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提要

ABSTRACT

绪论

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

致谢