鸭肿头败血症病毒疫苗免疫应答及病理学研究

摘要

鸭肿头败血症(DuckSwollenHeadSepticemia，DSHS)是近年流行的、以肿头、全身败血、高发病率、高死亡率为特征的一种鸭急性病毒性传染病。该病给当地养鸭业带来极大的损失。“鸭肿头败血症”与鸭瘟等疫病在临床症状、病理变化等方面有许多相似之处，给临床诊断带来困难；而且当前存在着缺乏有效免疫方法，以及致病机理不清楚等问题。本研究建立了鸭肿头败血症病毒抗体的间接ELISA方法，并在此基础上作了鸭肿头败血症疫苗的免疫应答研究，以及鸭肿头败血症的鸭胚病理学研究。 首先，本研究采用葡聚糖G-200层析技术纯化鸭肿头败血症病毒(DuckSwollenHeadSepticemiaVirus，DSHSV)，用纯化的DSHSV作为包被抗原，建立了检测DSHSV灭活疫苗免疫后的鸭血清中特异性抗体的ELISA方法。确定了抗原最佳包被浓度为6μg/ml，封闭液为2％明胶，待测血清稀释度为1∶400，兔抗鸭血清稀释度为1∶800，酶标羊抗兔的最佳稀释度为1∶2000，血清样品阳性样品判断的临界值OD490nm值为0.44。建立的方法敏感性高，重复性好，特异性强，不与鸭肿头败血症阴性血清、鸭大肠杆菌阳性血清、鸭瘟、鸭肝炎病毒阳性血清呈现交叉反应。 在此基础上，应用建立的间接ELISA方法、玫瑰花环试验、攻毒保护试验研究鸭肿头败血症疫苗免疫应答。试验结果表明，两种疫苗在一免后7-14d，蜂胶苗组E花环结合率极显著高于其它组(P＜0.01)；在一免后21-84d，油苗2组E花环结合率极显著高于其它组(P＜0.01)。在一免后7-21d，蜂胶苗2组EA花环结合率极显著高于其它组(P＜0.01)；在一免后28-84d，油苗2组EA花环结合率极显著高于其它组(P＜0.01)，试验组B细胞免疫水平均高于对照组(P＜0.01)。而且在一免后7-56d，蜂胶苗2组的特异性抗体水平极显著高于其他组(P＜0.01)，试验组的特异性抗体水平极显著高于对照组(P＜0.01)。强毒攻击的试验结果表明两种疫苗对强毒的攻击都有保护力，保护率分别是蜂胶苗2组90％，蜂胶1次免疫组80％，油乳剂1次免疫组50％，油乳剂2次免疫组80％。 最后，鸭胚接种鸭肿头败血症病毒，然后观察其解剖、组织病理和细胞超微结构，表明鸭肿头败血症病毒在胚上引起全身性败血症，肝脏出血，肝血窦充血出血，肝细胞颗粒变性、空泡变性，有大量炎性细胞浸润；肾脏充血出血，肾小管内有大量蛋白质，形成蛋白管形。肌肉出血，尤其是腿肌出血严重，在镜下皮下片状出血，肌丝间有大量红细胞浸润。脑膜出血，脑基质水肿。

目录

文摘

英文文摘

论文独创性声明及关于论文使用授权的声明

前言

第一章间接ELISA检测鸭肿败血症病毒抗体的研究

第二章鸭肿头败血症病毒疫苗免疫应答研究

第三章鸭肿头败血症病鸭胚病理研究

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文题目