灵芝-桔梗非药用部分固体双向发酵条件优化及抗氧化功效研究

摘要

桔梗Platycodon grandiflorum（Jacq．）A DC．是一种重要的药食两用植物，在用作食品和药材生产的过程中，产量巨大，除去地下部分的根茎外，每年将产生大量桔梗非药用部分，而目前国内把桔梗非药用部分当成农业废弃物未得到充分利用。灵芝（Ganoderma）是一种药用真菌，能把中草药作为真菌培养基的一部分进行固体发酵，发酵后的终产物不同于一般真菌固体培养产品，兼具真菌和中药材的功效，并可能产生新的功效。 本论文采用“新型（双向性）固体发酵工程”技术，以筛选的抗氧化特异性灵芝为出发菌株，在其培养基中部分添加桔梗非药用部分，通过发酵体系优化，初步建立灵桔菌质的生产工艺，并检测灵桔菌质的理化指标，开展其抗氧化功效研究。 1．抗氧化特异性菌株的确定：通过菌质抗氧化功效实验，从六种不同的灵芝菌株中，筛选获得抗氧化功效的最佳出发菌株为G． sinense。 2．桔梗非药用部分的分析：通过分析桔梗非药用部分的碳、氮含量，发现其碳氮比为50：1，为桔梗非药用部分作为灵芝发酵培养基奠定了基础。 3．灵桔双向发酵体系的建立：通过对不同培养基组成、湿度下灵芝菌丝的生长情况和灵桔发酵物抗氧化功效的研究，得出灵桔双向发酵的最佳培养基组成是桔梗非药用部分添加比例为30％，其他成分中玉米芯为66％、麦麸为4％；最佳湿度为55％。通过对不同时间获得发酵物抗氧化功效的评估，可确定发酵终点为满袋后5d。 4．灵桔菌质抗氧功效综合研究：抗氧化成分分析表明其含有的抗氧化成分有多糖和总酚。药效研究表明，灵桔菌质能延长急性脑缺血小鼠的喘息时间，而发挥对脑缺血缺氧的保护作用。

目录

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1 文献综述

1.1 真菌固体双向发酵

1.1.1 真菌固体发酵技术

1.1.2 真菌双向性固体发酵与中药生物工程

1.2 灵芝生产技术研究

1.2.1 栽培技术研究

1.2.2 液体发酵技术研究

1.2.3 固体双向发酵技术研究

1.3 抗氧化研究进展

1.3.1 抗氧化研究概述

1.3.2 抗氧剂的种类

1.3.3 抗氧化研究方法

1.3.4 菌类抗氧化研究

1.4 灵桔菌质生产工艺研究的意义

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

2.1.1 主要仪器

2.1.2 主要试剂

2.2 试验动物

2.3 灵芝抗氧化特异性菌株筛选

2.3.1 供试菌株

2.3.2 灵芝固体发酵

2.3.3 灵芝发酵产物(SSF)抗氧化功效检测样品制备

2.3.4 灵芝发酵产物抗氧化检测

2.4 桔梗非药用部分研究

2.4.1 基原及性状

2.4.2 相关化学成分测定

2.5 灵芝-桔梗非药用部分双向发酵体系的优化

2.5.1 桔梗非药用部分添加比例的优化

2.5.2 培养基组合优化

2.5.3 培养基湿度的优化

2.5.4 最佳发酵终点的确定

2.6 灵桔菌质抗氧化相关研究

2.6.1 抗氧化化学成分检测

2.6.2 灵桔菌质体外抗氧化作用

2.6.3 灵桔菌质对缺血缺氧小鼠的保护作用评价

2.6.4 灵桔菌质对辐照氧化损伤小鼠的保护作用评价

3 结果与分析

3.1 灵芝抗氧化特异性菌株

3.2 桔梗非药用部分

3.3 灵芝-桔梗非药用部分固体双向发酵体系

3.3.1 桔梗非药用部分添加比例

3.3.2 培养基组合

3.3.3 培养基的湿度

3.3.4 发酵终点

3.4 灵桔菌质抗氧化性

3.4.1 灵桔菌质抗氧化成分

3.4.2 灵桔菌质体外抗氧作用

3.4.3 灵桔菌质对急性缺血缺氧小鼠的保护作用

3.4.4 灵桔菌质对辐照氧化损伤小鼠的保护作用

4 讨论

4.1 灵芝抗氧化特异性菌株

4.2 桔梗非药用部分成分分析

4.3 灵芝对桔梗非药用部分固体双向发酵

4.4 灵桔菌质抗氧化性

4.4.1 灵桔菌质抗氧化成分

4.4.2 灵桔菌质体外抗氧化作用

4.4.3 灵桔菌质对急性缺血缺氧小鼠的保护作用

4.4.4 灵桔菌质对辐照氧化损伤小鼠的保护作用

5 结论

参考文献

硕士期间发表的论文

致谢