氯化镍对肉鸡法氏囊影响的病理学研究

摘要

本文的目的是研究氯化镍致肉鸡法氏囊的病理损伤。试验选用1日龄科宝肉鸡健雏280只，随机分成4组，每组70只，分别饲喂对照日粮和高镍日粮（高镍Ⅰ组:300 mg/kg，高镍Ⅱ组:600 mg/kg，高镍Ⅲ组:900 mg/kg，镍源:氯化镍，NiC12），自由饮水。试验期为42天。试验第14，28和42天时，运用病理学、流式细胞术、荧光定量PCR和ELISA等方法观察了法氏囊病理损伤指标的改变，与对照组比较，取得以下结果:
　　1.高镍组法氏囊体积减小、重量减轻。病理组织学观察见法氏囊皮质、髓质区淋巴细胞减少。
　　2.高镍组法氏囊SOD、CAT、GSH-Px活性显著降低(P＜0.05或P＜0.01)，抑制羟自由基能力显著下降（P＜0.05或P＜0.01），GSH含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01)，MDA含量显著升高（P＜0.05或P＜0.01）;同时，CuZn-SOD、Mn-SOD、CAT、GSH-PxmRNA表达水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3.G0/G1期，高镍组法氏囊淋巴细胞百分比显著升高（P＜0.05或P＜0.01）;S期，法氏囊淋巴细胞百分比显著降低（P＜0.05或P＜0.01）;法氏囊淋巴细胞增值指数显著降低(P＜0.05或P＜0.01)。
　　4.高镍组法氏囊淋巴细胞凋亡率显著升高（P＜0.05或P＜0.01）;同时，Bax，Caspase-3, CytC, Apaf-1，Caspase-6，Caspase-7，Caspase-9 mRNA表达水平显著升高（P＜0.05或P＜0.01），Bcl-2 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。
　　5.高镍组法氏囊和血清免疫球蛋白(IgG、IgM)含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01)。
　　结论:日粮氯化镍添加300 mg/kg及其以上时对肉鸡法氏囊产生免疫毒性，引发免疫功能降低。法氏囊发育受阻、细胞周期停滞、细胞凋亡和氧化损伤是法氏囊免疫功能受损的病理基础和分子基础;淋巴细胞和免疫球蛋白分泌减少则是法氏囊免疫功能受损的体现。

目录

声明

论文说明

摘要

缩写词表

1 文献综述

1．1 镍和氯化镍的理化性质

1．2 生物体内镍的含量、分布及代谢

1．3 镍的营养生理作用

1．4 镍及其化合物对机体的毒性作用

1．4．1 对代谢的影响

1．4．2 对呼吸系统的影响

1．4．3 对造血系统的影响

1．4．4 对皮肤的影响

1．4．5 对生殖及胚胎的影响

1．4．6 对肝脏的影响

1．4．7 对肾脏的影响

1．5 镍及镍化合物的致癌性

1．6 镍的免疫毒性

1．7 镍缺乏对机体的影响

1．8 线粒体凋亡途径相关因子

2 研究目的及意义

3 材料与方法

3．1 试验材料

3．1．1 试验动物及日粮

3．1．2 主要仪器和试剂

3．2 试验方法

3．2．1 动物分组及饲养管理

3．2．2 临床观察

3．2．3 法氏囊病理学观察

3．2．4 法氏囊细胞周期的检测

3．2．5 法氏囊细胞凋亡的检测

3．2．6 ELISA法检测IG含量

3．2．7 法氏囊抗氧化指标检测

3．2．8 荧光定量PCR法检测抗氧化酶mRNA表达水平

3．3 试验数据分析

4 结果

4．1 临床观察

4．2 病理学观察

4．2．1 剖检变化

4．2．2 组织学变化

4．3 法氏囊细胞周期变化

4．4 法氏囊细胞凋亡变化

4．4．1 法氏囊细胞凋亡百分率变化

4．4．2 法氏囊线粒体凋亡通路相关因子的mRNA表达结果

4．5 法氏囊和血清IgA、IgG和IgM含量变化

4．5．1 法氏囊IgA、IgG和IgM含量变化

4．5．2 血清IgA、IgG和IgM含量变化

4．6 法氏囊抗氧化指标的变化

4．6．1 MDA含量变化

4．6．2 组织抑制羟自由基能力变化

4．6．3 GSH含量变化

4．6．4 CAT活性的变化

4．6．5 SOD活性的变化

4．6．6 GSH-Px活性的变化

4．7 法氏囊抗氧化酶mRNA表达水平的变化

4．7．1 CuZn-SOD mRNA表达水平的变化

4．7．2 Mn-SOD mRNA表达水平的变化

4．7．3 CAT mRNA表达水平的变化

4．7．4 GSH-Px mRNA表达水平的变化

5 讨论

5．1 临床症状

5．2 氯化镍对法氏囊形态结构的影响

5．3 氯化镍对法氏囊细胞凋亡的影响

5．4 氯化镍对法氏囊氧化损伤的影响

5．5 氯化镍对法氏囊和血液免疫球蛋白的影响

6 结论与创新

参考文献

图版及说明

致谢

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