人原发性肝癌中GSTP1基因启动子区甲基化状态及克隆的研究

摘要

原发性肝癌是世界上严重威胁人类健康的重要恶性肿瘤之一。中国人原发性肝癌的主要病因是HBV感染，其发展过程为慢性肝炎→肝硬化→肝癌。为探讨GSTP1基因启动子区甲基化与HBV感染，肝硬化和肝癌的关系，并探索GSTP1基因甲基化作为分子标志物在原发性肝癌的早期诊断、肝硬化向肝癌发展的动态监测、以及作为基因治疗的靶点进行基因治疗的可能性。本研究即检测了26例原发性肝癌患者的癌组织和相应的远癌组织以及32例患者外周血清标本中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态，并分析其高甲基化状态与HBV感染病史的相关性，及其在肝癌发生发展中的作用。　　在此基础上，构建了GSTP1基因启动子甲基化和去甲基化CpG岛区荧光真核表达载体，为进一步在体外研究GSTP1基因启动子区甲基化/去甲基化的表遗传调控机制奠定了基础。　　通过实验得出结论：抑癌基因GSTP1启动子区CpG岛甲基化可能是人原发性肝癌发生发展中的重要事件，在HBV感染的慢性肝炎发展为肝癌的过程中起着重要的作用，GSTP1抑癌基因的甲基化可能会作为一个很好的分子标志物，通过无创性的外周血标本的检测来对慢性肝病进行动态监测，可能对肝癌的早期筛查，诊断和预测预后均具有重要的临床意义.　　成功的构建了重组质粒pGL3-GSTP1pro和pGL3-GSTP1prom，为下一步进行甲基化逆转的研究奠定了实验基础，也为临床进行基因治疗提供了理论基础.

目录

前言

第一部分人原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究

材料与方法

结果

讨论

第二部分GSTP1基因甲基化启动子调控区的克隆和鉴定

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

文献综述：肝癌相关基因甲基化谱研究进展

参考文献

致谢

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