温阳消饮法对胸腔积液大鼠小肠AQP4与cAMP-PKA/PKC信号通路表达影响的研究

摘要

目的：通过研究温阳消饮方与去桂消饮方对胸腔积液模型大鼠胸腔积液的治疗效果、小肠水通道蛋白-4、cAMP-PKA/PKC信号通路表达的影响，探讨温阳消饮法调节水液代谢的部分作用机制。
　　方法：采用计算机随机分组方法，将Wistar成年大鼠（雌雄各半）随机分为温阳消饮组(W)、去桂消饮组(Q)、模型组(M)、空白组(K)，每组10只。对除空白组外的其余3组动物以1％角叉菜胶胸腔注射建立大鼠胸腔积液（悬饮）模型，造模24h后拍计算机X线摄影胸片对各组大鼠进行病理评价。于造模成功后2h给予W组、Q组相对应药物灌胃，每天1次，连续5天；模型组、空白组不给予任何措施。灌胃结束24h后处死各组大鼠，收集大鼠两侧胸腔积液，采集小肠组织，用蛋白印迹法检测小肠组织中AQP4的表达，用酶联免疫吸附法检测其cAMP、PKA、PKC的表达，比较各组结果。
　　结果：(1)各组胸腔积液量：与空白组比较，其余各组大鼠胸腔积液量差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，中药组大鼠胸腔积液量差异有统计学意义（P<0.05）；温阳消饮组与去桂消饮组比较，其胸腔积液量差异无统计学意义（P>0.05）。
　　(2)小肠组织AQP4的表达：经中药干预后，与空白组比较，模型组表达降低（P<0.05）；温阳消饮组高于模型对照组（P<0.05）；温阳消饮组和去桂消饮组与空白组比较差异无统计学意义（P>0.05）。
　　(3)小肠组织cAMP的表达：各组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　(4)小肠组织PKA表达：与空白组比较，其余各组表达均升高（P<0.05）；温阳消饮组及去桂消饮组与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）。
　　(5)小肠组织PKC表达：各组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　(6)小肠组织透射电镜显示，模型组大鼠小肠上皮细胞表面微绒毛排列稀疏，细胞内线粒体明显肿胀，用药组大鼠小肠上皮微绒毛排列紧密，细胞内线粒体、核糖体、粗面内质网等细胞器结构清晰。
　　结论：(1)λ-角叉菜胶能成功制备胸腔积液模型。
　　(2)温阳消饮方及去桂消饮方能明显减少模型大鼠胸腔积液量。
　　(3)在λ-角叉菜胶所致胸腔积液模型中，大鼠小肠AQP4的表达降低，温阳消饮法可上调胸腔积液模型大鼠小肠AQP4的表达，这可能是温阳消饮法从脾主运化方面消除胸腔积液的具体体现。
　　(4)在本实验中，cAMP-PKA/PKC信号通路并不是调控小肠AQP4表达的关键因素。
　　(5)小肠组织通过小肠上皮细胞表面微绒毛的改变参与了温阳消饮法对胸腔积液消除的过程。

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缩略词表

1 前言

2 文献研究

2.1 中医对水液代谢的认知

2.2 现代医学对人体水液转运的认识

3.实验研究

3.1实验材料

3.2实验方法

3.3 实验结果

4．讨论

4.1悬饮与胸腔积液的相关性

4.2悬饮的病因病机

4.3悬饮的治法与方药

4.4指标选择

4.5结果分析

结论

问题与展望

致谢

参考文献

综述: 中医药调控AQP4的研究

附录

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