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缩 略 词
第一部分 点突变Dhtkd1基因敲入小鼠模型的建立及表达谱分析
前言
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 实验试剂
1.3 常用试剂配方
1.4主要仪器设备
1.5引物合成
2 实验方法
2.1 ET打靶载体的构建(构建方案参照本实验室常用流程[15])
2.2 ES细胞阳性克隆筛选
2.3 嵌合雄鼠繁育杂合子小鼠
2.4 Dhtkd1基因表达谱分析
2.5 杂合子小鼠育种及点突变敲入小鼠基因型鉴定
2.6 三种基因型小鼠RNA水平Dhtkd1基因的表达比较
3 结果
3.1 ET打靶载体的构建
3.2 ES细胞阳性克隆筛选
3.3 嵌合雄鼠繁育杂合子小鼠
3.4 Dhtkd1基因表达谱分析
3.5 杂合子小鼠育种及点突变敲入小鼠基因型鉴定
3.6 三种基因型小鼠RNA水平Dhtkd1基因的表达比较
4 讨论
参考文献
第二部分Dhtkd1突变基因敲入小鼠模型的表型初步分析
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 实验试剂
1.3常用试剂配方
1.4主要仪器设备
1.5引物合成
2 实验方法
2.1 含点突变Dhtkd1基因的小鼠胚胎干细胞观察
2.2 点突变Dhtkd1基因敲入小鼠模型的表型初步分析
3 结果
3.1 含点突变Dhtkd1基因的小鼠胚胎干细胞观察
3.2 点突变Dhtkd1基因敲入小鼠模型的表型初步分析
4 讨 论
参考文献
结论
第一部分 Dhtkd1突变基因敲入小鼠模型的建立及表达谱分析
1 Dhtkd1Tyr486*突变敲入小鼠模型建成并已获纯合子小鼠
2. Dhtkd1在C57BL/129系小鼠体内的表达情况
第二部分 Dhtkd1突变基因敲入小鼠模型的表型初步分析
1.Dhtkd1Tyr486*突变杂合小鼠胚胎干细胞增殖正常、但较野生型细胞易凋亡且代谢能力降低
2. Dhtkd1Tyr486*突变小鼠繁殖正常,坐骨神经未发生明显病变
3. Dhtkd1Tyr486*突变纯合小鼠机体代谢能力显著下降,感觉减退
综述:无义介导的mRNA降解机制及其在单基因遗传病中的作用
致谢
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