多极去肾神经化消融导管治疗顽固性高血压的机制探讨与临床前期研究

摘要

研究目的：本课题应用自主开发研制的具有自主知识产权的多极射频消融导管，验证其安全性和有效性后，通过对高血压动物模型进行双侧肾动脉射频消融，系统评价该治疗对机体心率血压、全身RAS系统及中枢交感神经系统的影响，以分析其可能的降压机制，为后续临床推广应用提供强有力的理论和实验依据。
　　研究方法：第一部分的实验动物为14头正常小猪，随机分成四组（55°5瓦组、55°8瓦组、65°5瓦组、65°8瓦组），使用多极射频消融导管分别进行双侧肾动脉射频消融，所有动物于术前、消融术后即刻及术后3月留血，评估RDN术对血浆肾素活性、醛固酮、血管紧张素I、血管紧张素II的影响并通过免疫组织化学法检测肾动脉神经表达。
　　第二部分为建立DOCA高血压小猪模型，监测建模前后血压、血浆肾素活性、醛固酮、血管紧张素I、血管紧张素II、血浆去甲肾上腺素、肾上腺素、血肌酐、血NADPH氧化酶、血清eNOS、血NO的变化，用免疫荧光法和Western Blot技术定量检测建模前后下丘脑PVN中ACE1、AT1R、ACE2、MasR、nNOS的蛋白表达，化学荧光法测定建模前后肾脏和下丘脑PVN中ROS含量的变化。
　　第三部分实验在DOCA高血压猪模型上，使用多极射频消融导管分别进行双侧肾动脉射频消融，所有动物于术前、消融术后1月留血，评估 RDN术对血浆肾素活性、醛固酮、血管紧张素I、血管紧张素II的影响，用免疫荧光法和Western Blot技术定量检测RDN术后下丘脑PVN中ACE1、AT1R、ACE2、MasR的蛋白表达。
　　研究结果：第一部分实验过程中1头小猪因麻醉意外死亡，余13头小猪成功进行双侧肾动脉消融术并存活至术后3个月。与RDN术前相比，术后血压明显下降，病理提示肾动脉内膜增生、肾动脉外周交感神经染色可见神经纤维分布不均匀，炎性细胞浸润，组织坏死、髓鞘变性、轴突稀疏，连续性中断。此外，肾动脉射频消融治疗可显著降低猪血浆肾素活性、醛固酮、血管紧张素I、血管紧张素II的水平。
　　第二部分实验过程中，2头小猪因腹膜后血肿死亡，2头小猪因猪瘟死亡，10头小猪存活至术后1月，均出现过股动脉鞘管脱落或堵塞，其中2头小猪通过颈动脉重新置管。与建模前相比，建模后血压明显升高，血浆肾素活性、血管紧张素I、血管紧张素II、醛固酮、血清eNOS和血NO水平明显下降，血浆去甲肾上腺素、血清NADPH氧化酶水平及组织内ROS含量明显上升，随访肌酐无明显变化。下丘脑PVN中ACE1、AT1R蛋白表达增强（p<0.05），ACE2、MasR、nNOS蛋白表达减弱（p<0.05）。
　　第三部分实验过程中，8头DOCA高血压小猪及3头正常小猪成功进行双侧肾动脉消融术，并存活至术后1月。与RDN术前相比，术后血压明显下降，血浆肾素活性、血管紧张素I、血管紧张素II、醛固酮水平明显下降，下丘脑 PVN中 ACE1、AT1R蛋白表达下降(P<0.05)，ACE2、MasR的蛋白表达增强(P<0.05)。
　　结论：使用该多极射频消融导管行肾动脉射频消融治疗可安全、有效地通过阻断RAS系统的激活、上调下丘脑中枢ACE2、MasR蛋白表达水平，下调ACE、AT1R蛋白表达水平，恢复中枢RAS系统的失衡，抑制中枢交感活性来治疗高血压。

目录

声明

英文缩写对照表

第一部分多极射频消融导管在去肾交感神经术中的安全性和有效性研究

1 前言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

5 结 论

6 文献

第二部分 高血压小猪模型建立

1 前言

2 材料和方法

3 结果

4 讨论

5 结论

6 文献

第三部分多极去肾神经化消融导管治疗高血压猪的机制探讨

1 前言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

5 结论

6 文献

攻读期间发表文章目录

致谢

附录 综述：经皮去肾交感神经术与中枢交感神经系统