四指马鲅胚胎生活史,受精卵和早期仔鱼盐度适应性及消化道发育研究

摘要

1、四指马鲅胚胎发育观察 利用人工养殖的2龄亲鱼自然产卵受精而获得的受精卵在实验室中孵化和培育，此期间进行详细的观察记录。结果表明：四指马鲅（Eleutheronema tetradactylum）受精卵是圆球形表面无绒毛，是光滑的，在偏中央处有一个油球。平均卵径675.78μm，油球平均直径258.46μm。在水温31~33℃，盐度27.50~28，pH8.2条件下，胚胎发育用时13 h52 min，可分为6个阶段（卵裂、囊胚期、原肠期、胚体期、器官分化和孵化期，初孵仔鱼较小，全长1.46±0.25mm，3DAH仔鱼全长2.42±0.18mm，口和肛门张开，仔鱼开口摄食。 2、四指马鲅受精卵和仔鱼对不同盐度的耐受性研究 观察了11个盐度梯度（5、7、9、11、13、15、20、25、28、30、35、40、45，28作为对照组）下四指马鲅不同发育阶段（第一次分裂前和原肠期）的受精卵的沉浮性质和孵化情况，并以不投饵为单一影响因子，观察初孵仔鱼的存活情况，测定不投饵存活系数（survival activity index）SAI。结果表明：两发育阶段的受精卵（胚胎）在盐度低于25的海水中均呈沉性，25时则悬浮，28~45时表现浮性；第一次分裂前的受精卵对盐度改变较敏感，而原肠期受精卵对盐度胁迫产生一定的耐受性；初孵仔鱼的存活率（SAI值）对盐度的改变反响较大。综合孵化率、仔鱼畸形率以及 SAI值三种指标分析，推测适宜四指马鲅受精卵孵化的盐度范围为25~35，最适为35。 3、四指马鲅仔稚鱼、幼鱼和成鱼消化道的发育比较组织学研究 运用组织学切片技术研究四指马鲅出膜后1~65天（day after hatching，DAH）仔鱼以及成鱼（养殖1年）的消化系道形态和结构的变化。结果显示：在温度29~32℃，盐度25~28，溶氧4.80~5.5 mg/L，pH8.0~8.3条件下，1DAH仔鱼未见成形的消化管，由简单的肠管的组成，紧贴腹壁和卵黄囊。卵黄囊在3DAH时完全吸收完毕，仔鱼开口摄食，消化管也与外界相通，此后逐渐分化出食道、胃部和肠道等固有成分，一定程度上能自主消化吸收食物维持自身生长，进入内源性营养期到外源性营养的过渡期。15 DAH时出现幽门盲囊和胃腺，消化道固有结构和功能成分进一步发育完善，30~35 DAH稚鱼消化道组织结构发育基本与幼鱼、成鱼相似，消化管壁由粘膜层、粘膜下层、肌肉层和外膜组成。消化管内粘膜皱褶、胃腺、粘膜上皮杯状细胞的数量在稚鱼、幼鱼、成鱼之间呈递增趋势，体现结构到功能逐渐发育完善的规律。本章根据四指马鲅消化道的发育特点讨论了育苗过程中的三大危险期并提出应对措施。 4、四指马鲅仔稚鱼、幼鱼和成鱼消化道粘液细胞组织化学比较研究 利用组织切片和AB-PAS（pH2.5）染色技术研究四指马鲅1~65 DAH和成鱼的消化道粘液细胞的发育和变化特征。结果显示食道在5DAH时便出现Ⅱ型粘液细胞。9DAH时，食道粘液细胞数量有所增加，胃部出现较为丰富的粘膜皱褶，在粘膜表面可检测出I型粘液细胞。15DAH的仔鱼胃腺区域出现Ⅱ型粘液细胞。肠道出现以圆形为主Ⅱ型粘液细胞。幽门盲囊在17DAH时出现Ⅱ型粘液细胞。23DAH仔鱼和30DAH仔鱼消化道粘液细胞以Ⅱ型为主。35日龄稚鱼消化道粘液细胞数量少，种类单一，食道含Ⅰ型和Ⅱ型粘液细胞，后者数量占优势；幽门盲囊却未检测出粘液细胞的分布；前肠含较多的Ⅰ型粘液细胞和少量Ⅲ型粘液细胞、中肠和后肠均只有Ⅱ型粘液细胞。65日龄幼鱼消化道各段粘液细胞数量快速增多，种类变丰富，食道、前肠和中肠均含Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型4种类型的粘液细胞，其余均含至少2两种类型的粘液细胞，粘液细胞密度食道最大，其次是后肠。成鱼食道、幽门盲囊均含Ⅱ型和Ⅳ型粘液细胞，胃部含有大量Ⅰ粘液细胞，胃腺区域则以Ⅳ型粘液细胞为主；肠道前中后段分布数量极多的Ⅲ、Ⅳ型粘液细胞。仔稚鱼、幼鱼、成鱼消化道粘液细胞的分布特点体现粘液细胞与消化道结构功能的发育相辅相成的规律。

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引言

1 四指马鲅简介

2 海水鱼类胚胎发育研究现状

3 鱼类消化道形态组织结构研究现状

4 鱼类消化道粘液细胞组织化学研究现状

6论文研究内容

7本研究的目的和意义

第一章： 四指马鲅胚胎发育观察

1 材料方法

2 结果

3 讨论

第二章：四指马鲅受精卵和仔鱼对不同盐度的耐受性研究

1 材料方法

2 结果

3讨论

第三章：四指马鲅仔稚鱼、幼鱼、成鱼消化道比较组织学的研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第四章：四指马鲅仔稚鱼、幼鱼和成鱼消化道粘液细胞发育的组织化学研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

结论

参考文献

附录

致谢