器官移植受者HLA-G5表达的初步探讨

摘要

HLA-G基因属于MHC非经典Ⅰ类基因，它拥有15个等位基因，能够编码7种不同的蛋白，即HLA-G1～G7，HLA-G1～G4为膜型，HLA-G5～G7为可溶性分子。HLA-G分子通过抑制介导移植物排斥反应的主要效应细胞的功能而发挥作用，如与NK细胞的杀伤抑制性受体(KIR，killedinhibitoryreceptor)结合从而抑制其杀伤活性、与CD4细胞表面的KIR结合抑制其增殖，HLA-G还以其特有的α3区与CD8细胞结合而诱导其凋亡。因此HLA-G可视为一种免疫耐受诱导分子，在临床上具有潜在的应用前景，对防治和监测器官移植排斥反应具有重要意义。 由于可溶性HLA-G5的结构和功能均比较明确，可有效抑制NK细胞杀伤活性、抑制T细胞增殖并诱导活化T细胞凋亡，并且没有抗原特异性，已经成为国外研究的热点之一，而且主要集中在体外模型。鉴于HLA-G5的体外实验环境和体内的微环境存在着很大的差异，无法反应临床中的实际意义，有必要对其体内特性进行研究。 本课题从检测移植受者的外周血HLA-G5的表达状况入手，采用酶联免疫吸附法、蛋白印迹法和流式细胞术等方法，探讨了HLA-G5在健康志愿者、肝移植受者、肾移植受者体内表达的异同，HLA-G5与排斥反应发生的关系，施行移植术后HLA-G5的表达情况以及HLA-G5与不同免疫抑制剂使用的关系。同时，对1例心脏移植受者HLA-G5的表达进行动态观察。最后，检测了同一天施行移植术的受者体内的HLA-G5和肿瘤坏死因子家族成员-FasL之间的相关性。 研究结果表明：30例健康志愿者中除2例(6.7％)HLA-G5含量分别为8ng/ml和9ng/ml外，其余28例(93.3％)均无HLA-G5的表达；比较50例肝移植受者与30例健康志愿者HLA-G5的表达水平发现，二者在统计学上存在着显著差异性(t=2.6834,P＜0.01)；比较50例肾移植受者与30例健康志愿者HLA-G5的表达水平发现，二者在统计学上存在着显著差异性(t=2.6904，P＜0.01)；50例肝移植受者和50例肾移植受者比较也存在着显著性差异(t=2.4772,P＜0.05)。HLA-G5阳性组排斥反应次数明显低于HLA-G5阴性组,50例肝移植受者16例HLA-G5阳性表达，仅1例出现急性排斥反应和慢性排斥反应。而34例阴性受者则10例发生了急性排斥反应，13例发生了慢性排斥反应；60例肾移植受者中，12例HLA-G5阳性表达，1例发生急性排斥反应，无慢性排斥反应的发生，而48例阴性表达者19例发生了急性排斥反应，16例发生了慢性排斥反应。通过移植术前术后的HLA-G5检测比较，可以看到HLA-G5的表达具有稳定性的特点。移植后使用不同的免疫抑制剂和HLA-G5表达之间无相关性。1例心脏移植后受者HLA-G5表达与国外报导相符。HLA-G5与FasL之间有一定的相关性。 通过对HLA-G5的体内检测提示，HLA-G5的表达水平与排斥反应及移植耐受有着密切的相关性，为其临床应用寻求可靠的直接依据，并为今后的进一步研究提供明确的思路，具有令人鼓舞的临床应用发展前景。

目录

英文缩略词表

前言

实验HLA-G5表达与排斥反应之间的关系

实验三HLA-G5表达与移植时间之间的关系

实验四HLA-G5与免疫抑制剂之间的关系

第二部分心脏移植受者一例HLA-GS水平的动态观察

第三部分HLA-G5与Fasl的相关性

结论

致谢

HLA-G：移植免疫相关的新分子

参考文献