亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的序列分析及重组多肽、DNA疫苗免疫原性的检测

摘要

该文分为三章:第一章:亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的序列分析.采用一步法分别分离了亚洲Ⅰ型FMDV强弱毒株的RNA,利用RT-PCR的方法从中扩增了674bp的DNA片段.克隆目的基因后,采用双脱氧DNA链末端终止法测得了其VP1基因36～633位的核苷酸序列.第二章：抗Asial型口蹄疫病毒的重组多肽疫苗免疫原性分析.据第一章研究结果推测Ⅰ型口蹄疫病毒（FMDV）VP1蛋白的133～158位氨基酸肽段可能是一重要的B细胞表位,而VP420～34位氨基酸肽段则是已知的重要的T细胞表位.第三章：抗Asial型口蹄疫病毒DNA疫苗重组载体构建及表达蛋白的免疫原性检测.采用真核偏爱密码子化学合成了VP1中编码133～158位氨基酸及VP4中编码20～34位氨基酸这两个抗原表位基因,将其组成133～158-20～34-133～158串联结构,在基5'端加上鼠Igκ链信号肽序列,在翻译调节区上增强表达的Kozak序列,同时在133～158-20～34-133～158串联结构3'端终止密码子下游加上CpG免疫刺激序列（CpG-ISS）,将这些片段连接后,克隆到真核表达载体pHook-2上,构建成功了DNA疫苗重组表达载体pAS1-E.用pAS1-E DNA 直接注射豚鼠体内表明,pAS1-E具有免疫原性.这为进一步研究最终用于防治口蹄疫疾病的DNA疫苗打下了重要基础.

目录

文摘

英文文摘

第一部分综述

参考文献

第二部分研究部分

第一章亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的序列分析

摘要

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

参考文献

第二章抗ASIA1型口蹄疫病毒重组多肽疫苗的免疫原性分析

摘要

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

参考文献

第三章抗ASIA1型口蹄疫病毒DNA疫苗重组载体构建及表达蛋白的免疫原性检测

摘要

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

参考文献

小结

后记

致谢