探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠脾细胞凋亡及Th1/Th2平衡的影响

摘要

研究背景： 性激素与免疫功能之间的复杂关系提示激素替代治疗(HormoneReplacementTherapy,HRT)会对绝经妇女的免疫功能产生多方面的影响，孕激素对绝经妇女免疫功能的影响研究较少。 研究目的： 本研究通过动物实验探讨醋酸甲羟孕酮(Medroxyprogesteroneacetate，MPA)治疗对更年期大鼠脾淋巴细胞凋亡及Thl／Th2平衡的影响。 材料和方法： 1、本实验取30只清洁级SD雌性大鼠(10只，2．5月龄，20只12月龄，由复旦大学实验动物部提供，合格证号：scsk沪动0033号)，更年期大鼠随机分为2组：(1)、更年对照组(10只，12月龄)，予蒸馏水lml．’d-1灌胃：；(2)、MPA组(10只，12月龄)，予MPA2mg．kg-I．一灌胃。另设年轻大鼠作为阳性对照，处理同更年对照组，三月后颈动脉插管放血处死大鼠。 2、留血清，放射免疫法测定孕激素(Progesterone,P)水平；ELISA法测血清Y-干扰素(Interferon．Y，IFN．Y)、白介素．4(Interleukin-4，IL-4)水平。 3、无菌取脾脏，研磨，制备脾细胞悬液，一部分细胞悬液放入培养箱(37℃、5％C02)培养24h后，采用AnnexinV-FITC、PI双染色后流式细胞仪测定脾细胞凋亡率；另一部分细胞悬液待提取脾细胞总RNA，盯一PCR技术检测脾细胞上Bcl-2、Bax凋亡基因的表达。 结果： 1、血清P浓度：更年期组大鼠明显低于年轻组和MPA组，P<0．0l；MPA组与年轻组相比无显著差异，P>0．05。 2、脾细胞凋亡率：更年期组高于年轻组，P<0．05；MPA组与更年组相比无显著差异，P>0．05。 3、凋亡基因的检测结果：更年期组促凋亡的Bax基因的转录水平高于年轻组大鼠，P<0．05：Bcl-2基因未见显著差异，P>0．05；MPA组促凋亡的Bax基因的转录水平高于更年期组大鼠P0．05。 4、血清IFN—Y水平：更年期组明显高于年轻组，P<0．01；MPA组与更年组相比差别无显著性，P>0．05。 5、血清IL-4水平：更年期组与年轻组相比差别未无显著性，P>0．05；MPA组与更年组相比差别无显著意义，P>0．05。 6、血清IFN．Y／IL-4比值：更年期组明显高于年轻组，P<0．0l：MPA组与更年期组相比差别无显著意义，P>0．05。 结论： 1、更年期大鼠血清孕激素水平明显下降，脾细胞凋亡率增加，这与更年期脾淋巴细胞上促凋亡基因Bax表达增加有关；更年期组MPA治疗后上调脾淋巴细胞促凋亡的Bax基因的表达，但脾淋巴细胞凋亡率未见显著差异。 2、更年期大鼠外周血淋巴细胞分泌IFN．Y量显著增加，IFN．Y／IL-4比值升高，Thl／Th2平衡向Thl漂移；MPA治疗后更年期大鼠Th／Th2平衡无明显改变。 3、孕激素对免疫细胞凋亡及Thl／Th2平衡的影响是十分复杂的，与其种类、浓度、作用部位、作用时间和方式均有关，阐明其变化及机制仍有待进一步的深入研有。

目录

前言

第一部分探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠脾细胞凋亡及相关基因调控的影响材料和方法

第一部分探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠脾细胞凋亡及相关基因调控的影响结果分析

第一部分探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠脾细胞凋亡及相关基因调控的影响讨论

第二部分探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠Th1/Th2平衡的影响材料与方法

第二部分探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠Th1/Th2平衡的影响结果分析

第二部分探讨甲羟孕酮治疗对更年期大鼠Th1/Th2平衡的影响讨论

参考文献

致谢

孕激素与免疫功能

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