黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤的组织形态、染色体易位及相关蛋白表达的研究

摘要

目的：系统地研究全身不同部位的黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(MALT淋巴瘤)的组织形态学特点和目前文献报道的几种MALT淋巴瘤相关的染色体异常，即t(11；14)(q21；q21)；t(1；14)(p22；q32)；t(14；18)(q32；q21)以及其他异常，并观察这些遗传学异常对相关蛋白(BCL10，CARMA1，NF-.B)表达的影响。
　　 方法：①收集全身不同部位的MALT淋巴瘤217例，包括眼眶和眼附件60例、胃47例、唾液腺25例、肺23例、肠20例、皮肤17例、肝脏8例、甲状腺6例、其它散发部位11例(咽喉3例，附睾2例、舌根2例、胸腺、牙龈、胰腺、肾脏各1例)，根据HE切片进行组织学评价；②用荧光素原位杂交(fluorescentin situ hybridization，FISH)的方法，使用API2-MALT1、BCL10、IgH、MALT1四种染色体探针，分别检测上述病例中几种染色体异常的发生情况；在检测MALT淋巴瘤中API2-MALT1融合基因时，同时比较了32例胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)内API2-MALT1融合基因的发生情况。③用免疫组织化学(IHC)的方法分别检测了10例扁桃体和5例淋巴结反应性增生、143例非MALT淋巴瘤的其他类型淋巴瘤和217例MALT淋巴瘤中BCL10的表达情况。并检测了其中74例MALT淋巴瘤内CARMA1和NF-.B蛋白的表达特点。
　　 结果：第一部分：①本研究组内MALT淋巴瘤主要发生在55岁左右的人群，平均年龄52.4岁，中位年龄53岁，并且以男性发生居多，男女比例1.5:1。②在低倍镜下，MALT淋巴瘤常具有结节样结构，并可分为四种不同模式：根据结节有无残留的生发中心可分为边缘区增生型和结节型(滤泡殖入)，并会进展为弥漫型并逐渐发生母细胞转化。但是这四种生长模式常混合在一起，并不是单独的生长类型。③MALT淋巴瘤细胞类型多样，可同时并存，也可以某种细胞为主。大量的单核细胞样B细胞(MBC)和大量核内包涵体的浆细胞等特点，在某些部位有提示恶性的作用。④MALT淋巴瘤多与慢性炎症刺激相关，在病变中两者可并存或互相移行，但如果出现明显浸润，如破坏血管壁、神经、上皮、侵犯深层组织等特点，结合部位和其他特点，有助于恶性的诊断。第二部分：①在淋巴组织反应性增生中，BCL10、CARMA1和NF-.B的表达模式类似，都表达在淋巴滤泡生发中心B淋巴细胞的细胞浆内，滤泡间细胞呈弱表达。②BCL10免疫组化显示，BCL10可广泛表达在不同类型的NHL中，在MALT淋巴瘤中细胞核表达有一定特异性(35.9％，78/217)，而在非MALT淋巴瘤的其他类型NHL中，除3例黏膜的DLBCL出现细胞核阳性外，在140例非MALT淋巴瘤的NHL中均未发现细胞核表达。③在不同部位的MALT淋巴瘤中，核阳性率有一定差异。从高到低分别为肠60.0％(12/20)；肺43.5％(10/23)；眼眶和眼附件43.3％(26/60)；肝脏37.5％(3/8)；胃36.2％(17/47)；皮肤29.4％(5/17)；甲状腺16.7％(1/6)；唾液腺4.0％(1/25)。④CARMA1蛋白在MALT淋巴瘤中多呈细胞浆阳性(77.0％，57/74)，部分呈细胞核阳性(8.1％，6/74)。经.2检验比较在BCL10核表达与CARMA1核表达之间无相关性(P=0.076)。⑤NF-.B/P65在MALT淋巴瘤中的阳性率为100％(74/74)，其中细胞浆阳性47.3％(35/74)，细胞核和细胞浆共同阳性占52.7％(39/74)。经.2检验分析，BCL10核阳性与NF-.B核表达间有显著相关性(P<0.001)，而CARMA1细胞核表达或细胞浆均与NF-.B核浆表达间无相关性(P>0.05)。第三部分：①在217例MALT淋巴瘤中，API2-MALT1融合基因共检出26例，占总体的12.0％。但是在不同部位，阳性率从高到低依次为肺39.1％(9/23)，不伴DLBCL成分的胃MALT淋巴瘤25.0％(10/40)，唾液腺12.0％(3/25)，肠10.0％(2/20)，眼眶和眼附件3.3％(2/60)。在7例伴DLBCL成分的胃MALT淋巴瘤、皮肤、甲状腺、肝脏和其他散发部位，均未发现API2-MALT1融合基因。在32例胃肠道DLBCL中，也均未发现API2-MALT1融合基因。②1例肺组织同时显示IgH和MALT1分离探针异常，可能是t(14；18)；6例(2例唾液腺、2例肝脏、1例伴DLBCL成分的胃和1例甲状腺)显示细胞内3个融合信号，可能为3体18；3例(1例胃、1例肠和1例伴DLBCL成分的胃)显示细胞内5～15个融合信号，为MALT1基因扩增。③3例(2例胃和1例肺)显示IgH与BCL10探针共同阳性，可能为t(1；14)。
　　 结论：第一部分：①MALT淋巴瘤是一类主要见于中老年人、并可广泛发生在全身多处结外部位的低度恶性B细胞淋巴瘤。但是在不同部位，其平均发病年龄、性别分布和细胞学特点都有一定的差异。但本组病例与国际淋巴瘤研究小组(ILSG)的临床资料比较，平均发病年龄年轻8岁左右(52.4岁VS61岁)，而且男性居多(男女比例1.5:1 VS1:1.2)。②MALT淋巴瘤中由于多样的细胞学特点，常与炎性增生性病变非常类似，也存在移行和相互重叠的中间状态，因此与炎症的鉴别是临床病理主要需要解决的问题，某些形态学特征具有一定的鉴别价值。第二部分：①BCL10免疫组化显示，在MALT淋巴瘤中有高比例的细胞核阳性率。但在非MALT淋巴瘤的其他类型NHL中，除部分胃原发的DLBCL中有核表达外，均未发现核表达，提示BCL10核表达对MALT淋巴瘤有相对特异性。对MALT淋巴瘤的病理诊断有一定的辅助价值，特别对肺和眼附件的淋巴组织增生性病变性质的判断有辅助价值。②BCL10核表达与NF-.B核表达间有显著相关性，提示BCL10核表达是细胞活化的重要因素之一，可能是部分病变细胞持续增殖发生恶性转化的机制。③胞浆内信号分子CARMA1也可表达在细胞核上，但机制和临床意义尚不明确，但CARMA1细胞核或细胞浆表达与BCL10核表达和NF-.B的活化间无显著联系。第三部分：①t(11；18)是MALT淋巴瘤中最常见的染色体异常，而t(1；14)、t(14:18)和其他异常则较罕见。但其总体发生率较低，遗传学检测不能作为敏感的诊断MALT淋巴瘤的标准。②t(11；18)均见于无大细胞转化的MALT淋巴瘤内，而在DLBCL中也未发现t(11；18)融合基因，提示这是低度恶性MALT淋巴瘤特有的遗传学异常，而且一般不会发生大细胞转化。③肺是全身各部位中最常出现遗传学改变的部位，FISH检测可对肺MALT淋巴瘤的诊断有辅助价值，特别对穿刺或活检的小标本的诊断有帮助。④在MALT淋巴瘤中可出现MALT1基因扩增。⑤BCL10免疫组化显示细胞核表达与染色体易位间没有必然的联系，用免疫组化的方法不能观察是否存在染色体异常。