海马神经发生在毒死蜱致迟发认知功能障碍中的作用

摘要

目的：
　　毒死蜱是目前国际上应用最广泛的有机磷农药之一，环境中的毒死蜱长期暴露，会对中枢神经系统造成严重危害，尤其是认知功能。流行病学研究结果显示长期的低剂量有机磷农药暴露会导致中枢神经系统永久性损伤。近年来，有机磷农药产生的神经毒性已经成为公众关注的焦点，然而其深层机制却了解的很少。因此，本研究的目的在于通过体外细胞培养，探讨毒死蜱长期的低剂量暴露产生的慢性细胞毒性作用及其潜在机制，为进一步阐明有机磷杀虫剂的慢性神经毒性作用机制提供理论基础。
　　方法：
　　在本研究中，探索胎鼠海马神经元原代培养神经元的最佳条件，并对原代培养神经元进行形态学和免疫荧光鉴定。
　　研究不同浓度的毒死蜱溶液暴露指定时间对神经元生长及存活的影响，通过细胞增殖-毒性实验和免疫荧光实验进行检测。
　　研究低剂量毒死蜱暴露对神经干细胞的影响，并进一步探讨其对神经发生过程中各阶段神经元的影响。
　　结果：
　　细胞形态学观察和免疫荧光染色结果显示：本研究中建立的胎鼠海马神经元原代培养体系中神经元生长状况良好，纯度较高，存活时间较长。
　　细胞增殖-毒性实验和免疫荧光染色实验结果显示：毒死蜱对原代培养海马神经元细胞的毒性呈现剂量依赖性；低剂量毒死蜱持续暴露无可检测的细胞毒性，停药后诱发延迟细胞毒性。
　　免疫荧光实验结果显示：低剂量毒死蜱持续暴露对培养体系中神经前体细胞、新生神经元和成熟神经元无影响，停药后却使新生神经元和神经前体细胞显著减少。
　　结论：
　　本研究建立了成熟稳定的胎鼠海马神经元原代培养体系。
　　验证了毒死蜱对神经元的剂量依赖性毒作用，确定了低剂量毒死蜱持续暴露致迟发细胞毒性，初步探索了低剂量毒死蜱暴露对神经发生的影响。
　　创新点：
　　首次以神经发生作为切入点来研究毒死蜱的慢性神经毒性机制。
　　利用原代细胞培养并结合体内实验，探讨低剂量毒死蜱暴露对神经发生的影响。
　　低剂量毒死蜱诱发延迟细胞毒性，导致神经前体细胞和新生神经元的减少。

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符号说明

1 前言

2 毒死蜱重复给药致大鼠空间记忆损伤

2.1 材料与方法

2.2 实验结果与分析

2.3 结论

2.4 讨论

3 胎鼠海马神经元原代培养体系的建立

3.1 材料与方法

3.2 实验结果与分析

3.3 结论

3.4 讨论

4 毒死蜱对原代培养海马神经元的毒性作用

4.1 材料与方法

4.2 实验结果与分析

4.3 结论

4.4 讨论

5 毒死蜱对原代培养海马神经干细胞的毒性作用

5.1材料与方法

5.2实验结果与分析

5.3 讨论

6 总结

参考文献

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