声明
符号说明
1 前言
1.1 苦木属植物抗炎活性
1.2 β-卡波林生物碱
1.2.1 抗艾滋病毒活性
1.2.2 抗炎活性
1.2.3 抗肿瘤活性
1.2.4 抗菌活性
1.2.5 抑制MAO活性
1.3 铁屎米酮生物碱
1.3.1 脑保护剂
1.3.2 PTP-1B抑制剂
1.3.3 抗炎活性
1.3.4 抗氧化活性
1.4 二聚体生物碱
1.4.1 抗肿瘤活性
1.4.2 抗炎活性
1.4.3 抗菌活性
1.5 立题依据与意义
2 实验材料、试剂、主要仪器和方法
2.1 实验材料
2.2 实验试剂
2.3 实验主要仪器
2.4 溶液配制
2.4.1 细胞培养液
2.4.2 75%乙醇
2.4.3 高压灭菌1×PBS缓冲液
2.4.45mg/mL MTT溶液
2.4.5100 μg/mL LPS溶液
2.4.6 1×TBS-T
2.4.7 1×电泳液
2.4.8 1×转膜液
2.4.9 5%脱脂奶粉
2.4.10 10%SDS
2.4.111M Tris-HCl（pH=8.8；pH=6.8）
2.4.12 30%Acri-bis
2.4.13 5×蛋白上样缓冲液
2.4.14 Western一抗二抗去除液
2.4.15 显影液
2.4.16 定影液
2.4.17 丽春红染液
2.4.18 TMB显色液
2.4.19 ELISA洗涤液
2.4.20 ELISA试剂稀释液
2.4.21 ELISA终止液
2.4.22 抗体稀释比例
2.5 细胞培养
2.5.1 细胞日常培养和传代
2.5.2 细胞冻存和复苏
2.5.3 细胞计数与铺板
2.6 MTT实验
2.6.1实验原理
2.6.2 实验步骤
2.7 Griess法
2.7.1 实验原理
2.7.2 实验步骤
2.8 ELISA法
2.8.1 实验原理
2.8.2 实验步骤
2.8.3检测化合物对LPS诱导RAW 264.7细胞释放PGE2的作用
2.8.4检测化合物对LPS诱导RAW 264.7细胞释放IL-6的作用
2.8.5检测化合物对LPS诱导RAW 264.7细胞释放TNF-α的作用
2.9Western Blot法
2.9.1 实验原理
2.9.2 实验步骤
2.10 数据处理
3 实验结果
3.1 75个化合物的初筛结果
3.2 4个活性化合物的细胞毒性
3.3 Greiss法检测化合物对NO释放的抑制作用
3.4 ELISA法检测化合物对PGE2释放的抑制作用
3.5 ELISA法检测化合物对IL-6释放的抑制作用
3.6 ELISA法检测化合物对TNF-α释放的抑制作用
3.7 检测化合物对iNOS和COX-2蛋白表达水平的作用
3.8 检测化合物对NF-κB通路中IκB-α蛋白降解的作用
3.9 MAPK通路
3.9.1 检测化合物对MAPKs通路中JNK蛋白磷酸化水平的影响
3.9.2 检测化合物对MAPKs通路中p38蛋白磷酸化水平的影响
3.9.3 检测化合物对MAPKs通路中ERK蛋白磷酸化水平的影响
4 结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文目录
致谢
版权声明
