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新型超声内镜穿刺针的研制及超声内镜引导下细针穿刺活检物对胰腺癌诊断价值的研究

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前言

第一部分新型超声内镜切割穿刺针的研制和体外模拟实验

第二部分胰腺癌超声内镜引导下细针穿刺活检物中CEA、CA19-9的检测

第三部分胰腺癌超声内镜引导下细针穿刺活检物中S100P基因的检测

第四部分胰腺癌超声内镜引导下细针穿刺活检物中mesothelin蛋白的检测

第五部分胰腺癌超声内镜引导下细针穿刺活检物中Cathepsin E、Maspin、S100P蛋白的检测

小结

综述1 胰腺癌的诊断方法及进展

综述2 胰腺癌差异表达基因的筛选及其诊断应用

在读期间发表文章及专利

致谢

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摘要

目的:超声内镜引导下细针穿刺活检术(EUS-FNA)诊断胰腺癌的准确性尚不理想,本课题拟从两个方面进行研究:研制新型穿刺针以提高获取活检物的能力,通过分子生物学方法检测EUS-FNA活检物中胰腺癌差异基因和蛋白的表达,以提高EUS-FNA诊断胰腺癌的敏感性。 方法:研制出一种能获取更多标本、操作简单的新型超声内镜穿刺针,并用体外模拟实验的方法初步评价其获取的标本能力。用电化学发光法检测胰腺癌EUS-FNA活检物中的CEA、CA19-9含量。PCR法检测胰腺癌EUS-FNA活检物中S100PmRNA的表达量。免疫组织化学和ELISA法检测mesothelin在胰腺癌EUS-FNA活检物中的表达。免疫印迹法检测胰腺癌EUS-FNA活检物中CathepsinE、Maspin、S100P蛋白含量。 结果:普通型穿刺针的平均细胞数为18.58±12.65个,新型穿刺针为36.88±17.91个,两者有显著差异(p<0.01)。胰腺癌患者EUS-FAN活检物中的CEA、CA19-9浓度明显高于血清中的浓度(p<0.05)。S100PmRNA在胰腺癌EUS-FNA活检物中有88.9%(8/9)表达,而在慢性胰腺炎EUS-FNA活检物中只有16.7%(1/6)表达。胰腺癌EUS-FNA标本中mesothelin蛋白浓度明显高于血清中的浓度(p<0.01),和慢性胰腺炎EUS-FNA活检物中的浓度(p=0.016)。胰腺癌EUS-FNA活检物中CathepsinE蛋白(p=0.029)、Maspin蛋白(p=0.023)、S100P蛋白(p=0.036)表达的阳性率都明显高于胰腺癌血清。 结论:本研究研制出新型超声内镜穿刺针,增加了EUS-FNA获取胰腺癌的标本数量。methoselin、CathepsinE、Maspin、S100P是胰腺癌差异基因,在胰腺癌中高表达。通过分子生物学方法分析EUS-FNA活检物中的CEA、CA19-9、methoselin、CathepsinE、Maspin、S100P,提高了EUS-FNA诊断胰腺癌的准确性,可以作为EUS-FNA涂片细胞学诊断的有效补充手段,具有较高临床应用价值。

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