复方呋喃西林纳米乳的制备及其对子宫内膜炎的治疗研究

摘要

通过对非离子型表面活性剂纳米乳的基础研究掌握规律并筛选适合制备医药用纳米乳的原料和处方，以此为基础制备出复方呋喃西林纳米乳。再通过对复方呋喃西林纳米乳的理化性质、稳定性、安全性、有效性和临床治疗效果进行考察，为复方呋哺西林纳米乳在兽医临床中的应用提供理论依据。 1、空白纳米乳的研制。以吐温80(Tween80)、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油(RH-40)等为表面活性剂，分别以司盘80(Span80)和丙二醇为助表面活性剂，再添加不同比例的油相：石蜡油、橄榄油和肉豆蔻酸异丙酯(IPM)等制备纳米乳。通过绘制伪三元相图研究不同的表面活性剂、助表面活性剂和油相等因素对纳米乳区形成的影响。共制备出Tween80/Span80/IPM/水、RH-40/橄榄油/水、Tween80/Span80/橄榄油/水以及RH-40/IPM/液体石蜡/水(Km=9:1、8:2)4种纳米乳，其外观澄明，性质稳定，经透射电子显微镜检测，其粒径均在1～100nm之间，符合纳米乳的要求。 2、复方呋喃西林纳米乳的研制。采用伪三元相图法进行处方筛选，将呋喃西林、替硝唑溶入Tween80/span80/橄榄油/水中制备出复方呋喃西林纳米乳，并考察其理化性质和稳定性，建立紫外可见分光光度法测定复方呋喃西林纳米乳含量，确定呋喃西林检测波长为375nm，标准曲线方程为：A=0.084C+0.0491(n=6)；(A为吸光度，C为浓度，μg/mL)，相关系数r=0.9992。线性浓度范围10～30μg/ml。平均回收率98.82％，RSD为1.5％。其外观淡黄色、澄清透明、性质稳定。在透射电子显微镜下观察，其为球状液滴，粒径在1～100nm之间。 3、复方呋喃西林纳米乳的安全性评价。通过昆明种小白鼠的子宫刺激性试验、子宫急性毒性试验、子宫长期毒性试验和细胞毒性试验对复方呋喃西林纳米乳进行安全性评价。结果表明，复方呋喃西林纳米乳对昆明种小白鼠子宫没有刺激性和毒性现象；复方呋喃西林纳米乳对L929成纤维细胞、子宫内膜基质细胞和子宫内膜上皮细胞的细胞毒性为<2级，均无明显毒性，符合纳米乳给药系统要求。 4、复方呋喃西林纳米乳的有效性评价。通过对子宫内膜炎主要致病菌的体外抑菌试验和小白鼠子宫内膜炎模型的治疗试验对复方呋喃西林纳米乳进行有效性评价。结果表明，复方呋喃西林纳米乳对子宫内膜炎主要致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和沙门氏菌的体外抑菌作用分别是呋喃西林粉剂的3倍、4倍、32倍和3倍。对主要致病菌所致的小白鼠子宫内膜炎模型的有效率和治愈率是100％和91.7％，显著高于常规制剂宫炎清溶液、宫必安和呋喃西林水溶液，差异极显著(p<0.01)。因此，通过体外、体内模型药效学研究，复方呋喃西林纳米乳是一种高效的抗菌制剂。 5、复方呋喃西林纳米乳对奶牛子宫内膜炎的疗效观察。通过对西安某奶牛场和北京某奶牛场的临床对比治疗试验表明复方呋喃西林纳米乳对奶牛子宫内膜炎具有较好疗效，与清宫液和宫康Ⅲ号混悬液疗效相当。总之，本研究开发出的纳米乳制剂治疗奶牛子宫内膜炎效果优于常规制剂，是一种高效、安全、稳定的纳米乳制剂，为临床治疗奶牛子宫内膜炎提供基础。

目录

文摘

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前言

声明

第一章文献综述

1.1奶牛子宫内膜炎国内外研究现状

1.1.1奶牛子宫内膜炎的发病原因

1.1.2子宫内膜炎的诊断

1.1.3实验室诊断

1.1.4子宫内膜炎的防治

1.2纳米乳研究进展

1.2.1纳米乳的形成原理

1.2.2纳米乳处方的选择

1.2.3纳米乳的制备方法

1.2.4相图行为研究[50]

1.2.5纳米乳在药剂学中的应用

1.3呋喃西林研究进展

1.3.1理化性质

1.3.2药理作用

1.3.3适应症

1.3.4呋喃西林现有剂型研究

1.3.5小结

第二章空白纳米乳处方的初步筛选及其影响因素考察

2.1材料

2.1.1试剂

2.1.2仪器

2.2方法

2.2.1纳米乳的制备方法和评价标准

2.2.2纳米乳基质的制备

2.2.3滴定法绘制伪三元相图

2.2.4利用伪三元相图对纳米乳的形成因素进行考察

2.3结果与分析

2.3.1纳米乳基质的制备

2.3.2表面活性剂的选择结果

2.3.3助表面活性剂的选择结果

2.3.4油相的选择结果

2.3.5利用伪三元相图对纳米乳的形成因素进行考察

2.4讨论

2.4.1纳米乳基质的制备

2.4.2利用伪三元相图对纳米乳的形成因素进行考察

2.4.3液晶相和凝胶的形成

第三章复方呋喃西林纳米乳的制备及其理化性质的考察

3.1仪器与材料

3.1.1仪器

3.1.2材料

3.2方法

3.2.1复方呋喃西林纳米乳的制备

3.2.2复方呋喃西林纳米乳类型的鉴别

3.2.3复方呋喃西林纳米乳的理化性质

3.2.4呋哺西林含量测定

3.3结果

3.3.1复方呋喃西林纳米乳类型的鉴别

3.3.2复方呋喃西林纳米乳的理化性质

3.3.3呋喃西林含量的测定

3.4讨论

第四章复方呋喃西林纳米乳的稳定性实验

4.1仪器

4.2方法

4.2.1考察项目

4.2.2影响因素试验

4.2.3恒温加速试验

4.2.4留样观察试验

4.3结果

4.3.1影响因素试验

4.3.2恒温加速试验

4.3.3留样观察试验

4.4讨论

第五章复方呋喃西林纳米乳的安全性实验

5.1材料

5.1.1试验动物和细胞株

5.1.2试验试剂

5.1.3实验仪器

5.2方法

5.2.1小鼠子宫刺激性试验

5.2.2小白鼠子宫急性毒性试验

5.2.3小鼠子宫长期毒性试验

5.2.4细胞毒性评价

5.3结果

5.3.1小鼠子宫刺激性试验结果

5.3.2小鼠子宫急性毒性试验结果

5.3.3小鼠子宫长期毒性试验结果

5.3.4细胞毒性实验试验结果

5.4讨论

5.4.1小鼠子宫刺激性试验

5.4.2小鼠子宫急性毒性试验

5.4.3小鼠子宫长期毒性试验

5.4.4细胞毒性试验

5.5 小结

第六章复方呋喃西林纳米乳的药效学评价

6.1材料与方法

6.1.1材料

6.1.2方法

6.2结果与分析

6.2.1体外抗菌活性

6.2.2最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)测定结果

6.2.3小鼠子宫内膜炎模型建立

6.2.4小鼠子宫内膜炎模型治疗试验

6.3讨论

6.3.1体外抑菌活性

6.3.2小鼠子宫内膜炎模型治疗试验

6.4小结

第七章复方呋喃西林纳米乳治疗奶牛子宫内膜炎的临床试验

7.1试验材料

7.1.1实验动物

7.1.2实验药品和器材

7.2实验方法

7.3治疗效果评价

7.4结果与分析

7.4.1西安某牛场试验结果

7.4.2北京某奶牛场试验结果

7.5 讨论

7.6 小结

结论

参考文献

致谢

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