三种主要代谢酶抑制剂对双氧木脂素A杀虫活性影响及透骨草灵Ⅰ增效作用研究

摘要

双氧木脂素A（haedoxan A）和透骨草灵Ⅰ（PhrymarolinⅠ）是从透骨草（Phryma leptostachya）中分离的木脂素类化合物，其中双氧木脂素A具有杀虫活性，与合成拟除虫菊酯类杀虫剂的杀虫活性相当。透骨草灵Ⅰ杀虫活性虽不显著但对氨基甲酸酯及除虫菊酯类杀虫剂具有增效作用。但迄今，双氧木脂素A的杀虫作用机理及透骨草灵Ⅰ的增效作用机理均不明确，极大地限制了其进一步的研究开发与应用。本研究以东方粘虫（Mythimna separata）为供试昆虫，昆虫体内三种主要代谢酶抑制剂胡椒基丁醚（PBO）、磷酸三苯酯（TPP）和二乙基甲氧基硼烷（DEM）为增效剂，测定比较双氧木脂素A和透骨草灵Ⅰ杀虫活性及对三种主要代谢酶活性的影响，旨在揭示双氧木脂素A的杀虫机理及透骨草灵Ⅰ的增效作用机理，主要结果如下： 1、双氧木脂素A对3龄粘虫具有胃毒活性，其24h的致死中浓度LC50为27.06μg/mL；透骨草灵Ⅰ对3龄粘虫具有麻痹活性，4h麻醉中浓度NC50为3157μg/mL；氯菊酯胃毒LC50为2.8μg/mL，触杀LC50为0.31μg/mL。 2、三种酶抑制剂PBO、TPP、DEM均能提高双氧木脂素A及透骨草灵Ⅰ对3龄粘虫的胃毒活性。饲喂酶抑制剂对双氧木脂素A增效作用PBO﹥TPP﹥DEM，相应增效倍数为2.72，1.91和1.71，其中PBO与DEM两者混用后增效作用最明显，增效倍数为9.63；点滴酶抑制剂对双氧木脂素A增效作用PBO﹥DEM﹥TPP，相应增效倍数为4.04，3.59和2.9；三种酶抑制剂均能使透骨草灵Ⅰ对3龄粘虫表现胃毒活性，增效作用TPP﹥PBO≈DEM，增效倍数为8.81、1.31、1.23。 3、双氧木脂素A能显著提升3龄粘虫体内羧酸酯酶活性，激活程度随浓度升高而先升高后降低，在LC75达到峰值，激活率为100%~189.12%。对NADPH-细胞色素C还原酶激活程度随浓度升高而降低，激活率为181.21%~331.2%。对谷胱甘肽-S-转移酶表现为抑制作用，抑制率随浓度变化先升高后降低，LC50达到峰值，抑制率为31.1%~42.86%。 4、透骨草灵Ⅰ对双氧木脂素A及氯菊酯活性具有增效作用，饲喂透骨草灵Ⅰ后，HA对3龄粘虫胃毒毒力提高2.28倍，增效能力介于PBO与DEM之间；氯菊酯胃毒毒力提高56倍；透骨草灵Ⅰ点滴作用下，氯菊酯对3龄粘虫触杀活性LC50为0.021μg/mL，活性提高14.76倍，其增效作用与TPP相当。 5、透骨草灵Ⅰ能显著提升3龄粘虫体内羧酸酯酶活性，激活程度与浓度成正相关，激活率为10.88%~117.39%。对GST激活程度随浓度变化先升高后降低，LC50达到峰值，激活率为38.99%~103.35%。对NADPH-细胞色素C还原酶活性影响表现为先抑制后激活作用，LC10-LC75浓度下为抑制作用，抑制率介于6.25%～37.5%，LC90激活率为6.24%。 上述结果表明，微粒体多功能氧化酶及羧酸酯酶是双氧木脂素A的主要代谢酶，羧酸酯酶是透骨草灵Ⅰ的主要代谢酶；透骨草灵Ⅰ可作为增效剂进行研发。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 植物源农药

1.1.1 植物源农药概述

1.1.2 植物源农药特点及发展前景

1.2 农用植物资源及其活性成分

1.2.1 杀虫植物资源及其活性成分

1.2.2 杀菌植物资源及其活性成分

1.2.3 除草植物资源及其活性成分

1.3.1 影响呼吸系统

1.3.2 影响消化系统

1.3.3 影响神经系统

1.3.4 影响代谢系统及其他

1.4.1 症状学观察

1.4.2 组织学观察

1.4.3 生理生化研究

1.4.4 受体研究

1.5.1 透骨草

1.5.2 透骨草化学成分研究

1.5.3 透骨草生物活性

1.5.4 双氧木脂素A

1.5.5 透骨草灵Ⅰ

1.6 问题的提出及论文设计思路

第二章 材料与方法

2.1.1 供试药剂

2.1.2 供试昆虫

2.1.3 仪器设备

2.2 实验方法

2.2.1 毒力测定

2.2.2 三种酶抑制剂增效作用测定

2.2.3 酶学实验方法

2.2.4 羧酸酯酶活性测定

2.2.5 谷胱甘肽-S-转移酶活性测定

2.2.6 NADPH-细胞色素C还原酶活性测定

第三章 结果与分析

3.1 毒力测定结果

3.1.1 HA和透骨草灵Ⅰ对3龄粘虫的毒力测定

3.1.2 三种主要代谢酶抑制剂对3龄粘虫毒力测定

3.2 增效作用

3.3 HA、透骨草灵Ⅰ、氯菊酯对三种代谢酶活性影响

3.4 HA和不同抑制剂对三种代谢酶活性的影响

第四章 问题与讨论

4.1 双氧木脂素A的主要代谢途径

4.2 双氧木脂素A对谷胱甘肽S-转移酶的抑制作用

4.3 透骨草灵Ⅰ的主要代谢途径

4.4 透骨草灵Ⅰ的增效作用

第五章 结论

参考文献

致谢

个人简历