紫外线对细胞DNA损伤与损伤中钙离子信号变化的荧光检测分析

摘要

UV是对生物体造成损伤的最基本的环境因子之一。检测小鼠肝细胞经UVA、UVB、UVC三种不同波段的紫外线处理后的细胞DNA损伤程度与损伤过程中的[Ca2+]i，旨在确定生物体损伤程度与UV波长和照射剂量之间的关系，对于研究UV损伤机理具有重要意义。 本文论述了生物细胞的DNA损伤的类型和成因，介绍了检测损伤的各种方法，探讨了细胞DNA损伤过程中的Ca2+信号的作用机理，并进行了大量的实验论证。实验中采用的是单细胞凝胶电泳法，分别检测了小鼠肝细胞经UVA、UVB、UVC三种不同波段的紫外线处理后的细胞DNA损伤程度、不同剂量的UV对细胞造成的DNA损伤程度，用比率荧光检测法测定了在UV损伤过程中小鼠肝细胞[Ca2+]i。其结果表明： ①UV能否对细胞DNA造成损伤主要取决于UV的波长(或频率)； ②UV的照射能量与其造成的细胞DNA损伤程度呈正相关； ③对细胞造成DNA损伤的UV具有低能量阈值和高能量平台； ④在UV损伤过程中[Ca2+]i会升高，其随时间波动的振幅和频率会发生变化。 上述结论在UV诱导的细胞DNA损伤与修复的机理研究与应用中具有实际意义。

目录

文摘

英文文摘

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第一章引言

1.1引起DNA损伤的因素

1.2检测DNA损伤的常用方法

1.3 DNA损伤中的钙信号

1.4研究目的及意义

第二章单细胞凝胶电泳技术简介

2.1单细胞凝胶电泳发展历史

2.2单细胞凝胶电泳特点

2.3单细胞凝胶电泳主要步骤

第三章单细胞凝胶电泳法检测UV对小鼠肝细胞的损伤

3.1实验材料

3.2UV对细胞DNA损伤的彗星电泳实验系统

3.3 UV对小鼠肝细胞DNA损伤的彗星电泳检测实验

3.4分析与讨论

3.5结论

第四章检测UV对小鼠肝细胞[Ca2+]i的影响

4.1实验材料和方法

4.2实验结果

4.3分析与讨论

4.4结论

第五章总结与展望

参考文献

致谢

附录：硕士期间发表的论论文